血中铊测定的石墨炉原子吸收光谱法论文

主堡蒸塑里生墼些疸蓥查！Ｑ！鱼生兰旦箜丝鲞箜！塑鱼！ｉ！』！型旦氇Ｑ竖！Ｐ堕！：垒巴！Ｑ！！：∑！！：丝！盟！：！・监测与检验技术・血中铊测定的石墨炉原子吸收光谱法张钦龙高舸【摘要】目的建立使用胶体钯化学改进剂测定血中铊含量的石墨炉原子吸收光谱法：方法吸取１．０ｍｌ全血，加入５％硝酸溶液１．０ｍｌ沉淀蛋白质后，以５“ｌ胶体钯作为化学改进剂，使用石墨炉原子吸收光谱法直接测定。在标准系列中加入０．２％氯化钠，以改善标准溶液与样品之间的基体匹配。结果该方法的线性范围为０．２～５０．０ＩＸｇ／Ｌ，回归方程式为ｙ＝Ｏ．００１９８ｘ，相关系数为０．９９９１，检出限为０．２仙ｇ／Ｌ，样品加标回收率为９８．０％一１０１．３％，相对标准偏差为１．８％．２．７％。对全血标准物质进行分析，测定结果在证书值范围内。结论该方法操作简便，结果准确．灵敏，可以满足血中铊的测定要求。【关键词】胶体钯；分光光度法，原子吸收；血液；铊ｆｕｒｎａｃｅａｔｏｍｉｃａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｆｏｒＧｒａｐｈｉｔｅｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈａｌｌｉｕｍｉｎｂｌｏｏｄＺｈａｎｇＱｉｎｌｏｎｇ，ＧｏｏＧｅ．ＣｈｅｎｇｄｕＣｅｎｔｒｅｆｏｒ【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｃｔｉｖｅＣｏｌｌｏｉｄａｌＤｉｓｅａｓｅＣｏｎｔｒｏｌａｎｄＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，Ｃｈｅｎｇｄｕ６１００４１，Ｃｈｉｎａａｓｐａｌｌａｄｉｕｍｗａｓｕｓｅｄｅｈｅｍｉｃａｌｍｏｄｉｆｉｅｒｉｎｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｂｌｏｏｄｔｈａｌｌｉｕｍｂｙｇｒａｐｈｉｔｅｆｕｒｎａｃｅａｔｏｍｉｃａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ．ＭｅｔｈｏｄｓＢｌｏｏｄｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｅｄｗｉｔｈ５％（Ｖ／Ｖ）ｎｉｔｒｉｃａｃｉｄ，ａｎｄｔｈｅｎｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＧＦＡＡＳｗｉｔｈｃｏｌｌｏｉｄａｌｐａｌｌａｄｉｕｍｕｓｅｄａｓａｃｈｅｍｉｃａｌｍｏｄｉｆｉｅｒ．Ｏ．２％（Ｗ／Ｖ）ｓｏｄｉｕｍｃｈｌｏｒｉｄｅｗａｓａｄｄｅｄｉｎｔｈｅｓｔａｎｄａｒｄｓｅｒｉｅｓｔｏｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｍａｔｒｉｘｍａｔｃｈｉｎｇｂｅｔｗｅｅｎｓｔａｎｄａｒｄｓｏｌｕｔｉｏｎａｎｄｓａｍｐｌｅ．ＲｅｓｕｌｔｓｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｗｅｒｅＴｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｌｉｍｉｔｗａｓ０．２“矶．Ｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｗａｓ０．９９９１．Ｔｈｅｂｅｔｗｅｅｎ９３．９％ｔｏ１０１．５％．Ｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｓｔａｎｄａｒｄｄｅｖｉａｔｉｏｎｓｗｅｒｅｂｅｔｗｅｅｎ１．８％ｃｏ２．７％．ＴｈｅｃｅｒｔｉｆｉｅｄｒｅｆｅｒｅｎｃｅｍａｔｅｒｉａｌｏｆｗｈｏｌｅｂｌｏｏｄｔｈａｌｌｉｕｍｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄａｎｄｔｈｅｒｅｓｕｌｔｗａｓｗｉｔｈｉｎｔｈｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅｒａｎｇｅＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅｍｅｔｈｏｄｉｓａｃｃｕｒａｔｅ，ｓｉｍｐｌｅａｎｄｓｅｎｓｉｔｉｖｅ，ａｎｄｉｔｂｌｏｏｄｅｎｔｉｒｅｌｙ．ｃａｎｍｅｅｔｔｈｅｎｅｅｄｓｏｆｄｅｔｅｃｔｉｏｎｔｈａｌｌｉｕｍｉｎ【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ｃｏｌｌｏｉｄａｌｐａｌｌａｄｉｕｍ；Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ，ａｔｏｍｉｃａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ；Ｂｌｏｏｄ；Ｔｈａｌｌｉｕｍ铊是一种银白色金属，属高毒类，在体内具有蓄积性ＩＩＩ。铊最初主要用于治疗头癣、性病，也有用作杀鼠灭虫的药剂。铊及其化合物可通过呼吸道、皮肤和消化道进人体内，吸收、分布于各个器官，主要损害中枢和周围神经系统、胃肠道和肾脏。当人体摄入过量的铊时．会引起急性中毒，发生脱发等成都微检科技有限公司）。２．样品采集与处理：用肝素钠抗凝管采集职业健康检查人群肘静脉血３．０ｍｌ。准确吸取１．０ｍｌ全血于５ｍｌ塑料离心管巾，加入５％硝酸溶液１．０ｍｌ，混匀后静置１５ｍｉｎ，以ｌＯ０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，上清液供测定用。将１．０ｍｌ去离子水一系列病症㈣。目前，国内没有血铊的正常参考值范围和生物接触限值，也无标准测定方法。因此，我们建立使用胶体钯作为化学改进剂的石墨炉原子吸收光谱法测定血中铊含量，血样只需５％（Ｖ／Ｖ）硝酸沉淀蛋白质，离心分离后即可进样测定。一、材料与方法１．仪器与试剂：ＰＥ８００原子吸收分光光度计（美国ＰＥ公司，配有ＴＨＧＡ型石墨炉和ＡＳ．８００自动进样器），铊空心阴极灯（美国ＰＥ公司），ＴＨＧＡ热解涂层石墨管（美国ＰＥ公司），ＥＬＧＡＰＵＲＥＬＡＢＵｌｔｒａ超纯水机（英国ＥＬＧＡ公司），ＨＣ．中加入５％硝酸溶液１．０ｍｌ制作试剂空白，混匀后供测定。３．标准应用液的制备：临用前准确吸取０．５ｍｌ铊标准溶液（１０Ｉｘｇ／ｍ１）于１００ｍｌ容量瓶中，加入ｌｍｌ硝酸、０．２ｇ氯化钠，纯水定容，该标准溶液为５０斗ｇ，Ｌ。由仪器自动稀释得铊标准应用液系列：１０．０、２０．０、３０．０、４０．０、５０．０“ｇ／Ｌ。稀释液为０．２％氯化钠溶液。４．样品的测定：按标准系列的测定操作条件，同时测定样品溶液和试剂空白，并南标准曲线计算样品的含量。５．仪器操作条件：测定波长２７６．８ｎｍ，灯电流６ｍＡ，狭缝通带０．７ｎｍ，进样体积２０斗ｌ，５斗ｌ胶体钯作为化学改进剂。石墨炉升温程序见表１。表１原子吸收光谱法测定血中铊的石墨炉升温程序２０６２高速离心机（安徽中科中佳科学仪器有限公司）。ＢＶ．Ⅲ级硝酸（北京化学试剂研究所），氯化钠（分析纯，国药集团化学试剂有限公司）；ｌ０００恤ｇ／ｍｌ铊标准溶液（国家钢铁材料测试中心），全血痕量元素标准物质（挪威Ｓｅｒｏｎｏｒｍ公司，ＴｒａｃｅＥｌｅｍｅｎｔｓＷｈｏｌｅＢｌｏｏｄＬ３）；胶体钯（专利号：ＺＬ２０１０１００２８１２１．９，ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．Ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－９３９１．２０１６．０４．０１９作者单位：６１００４１成都市疾病预防控制中心万方数据主堡董塾里生墼些疸垄查！！！！笙兰旦笙丝鲞笙！塑垦！！！！』！型坚埋Ｑ！！Ｐ望ｉ！！垒匹！Ｑ！垒：坠！：丝：坐：兰二、结果与讨论１．样品前处理方法的选择：全血中含有大量的有机物和无机盐，基体成分复杂，采用微波消解技术可将有机物进行彻底分解，使待测元素充分释放，但微波消解需要配备昂贵３０３６．原子化温度和时间的选择：原子化温度是整个原子吸收光谱分析升温程序中最关键的环节，直接影响原子化效率和测定灵敏度。温度过低，待测元素不能被完全原子化，温度过高将缩短石墨管使用寿命。我们观察原子吸收信号峰，发现当原子化温度低于１４００℃时易产生双峰或拖尾峰，样品在１４００～１的消解装置Ｍ；而直接稀释法虽然操作简便，但大量存在的有机物容易造成石墨管内壁碳的沉积而产生散射干扰１６Ｉ；湿法消解需要大量的酸，对环境和人体都将产生不利影响ＦＩ＋因此，我们采用５％（Ｖ／Ｖ）硝酸溶液作为萃取液和蛋白质沉淀剂，既能很好地将血中铊释放到硝酸溶液中，又能大大降低基体干扰，操作也相对简便二２．酸度的选择：分别采用１％、３％、５％、８％以及１０％（ＶＩＶ）的硝酸进行实验，结果显示，硝酸浓度低于３％时样品分层不彻底（仅有微量沉淀），高于８％时萃取分层明显，但血样加入时易出现凝块，且酸度过高会缩短石墨管的使用寿命。因此，我们采用５％（ＶＩＶ）硝酸溶液作为萃取液和蛋白质沉淀剂：３．标准应用液系列中的基体匹配：血液的基体复杂，并含有大量的氯化物，与水配置的标准溶液有严重的基体差异，从而导致样品与标准的原子化温度与原子化速率不一致，使得测定结果不准确。因此，在标准溶液中加入氯化钠作为基体匹配剂。配制浓度分别为０、０．Ｉ％、０．２％、０．３％、０．４％、０．５％氯化钠的标准系列，计算回收率分别为８３．８％、８９．７％、９９．５％、１０１．９％、１０３．９％、１１４．３％：结果表明．在标准溶液中加入０．２％氯化钠作为基体匹配剂可消除全血基体对血中铊测定的影响。９００℃时对应的回收率为１１３．６％、９５．１％、９６．８％、７００℃９９．２％、９９．１％、９８．８％。结果表明，当原子化温度为１时，吸收信号回到基线的时间为２Ｓ：因此，在满足检测要求的条件下，尽可能选择较低的原子化温度和较短的原子化时问，均有利于延长石墨管使用寿命：我们选择原子化温度为１７００ｏＣ，原子化时间为３Ｓ：０．二０『篓０－ｓ｝詈ｏｌｏｎｎＳｉｒ灰化温度（℃）图１石墨炉原子吸收光谱法测定血中铊的灰化温度一背景值吸光度曲线７．标准曲线的线性范围及方法的检出限：本方法线性范围为０．２～５０．０斗ｇ，Ｌ，回归方程式为ｙ＝Ｏ．００１９８ｘ，相关系数为０．９９９４．化学改进剂的选择：血样中含有大量的有机物和无机盐，可产生严重的背景吸收，采用塞曼扣背景，也不能完全有效扣除。铊属于易挥发的元素，而仅靠提高灰化温度来消除基体，又会导致铊的损失＝我们通过测定铊含量为４０斗ｇ，Ｌ的加标血样，比较磷酸二氨铵、氯化钯、胶体钯３种基体改进剂的效果，见表２÷胶体钯具有较高的比表面积，可以有效地捕集待测元素，在较高的灰化温度下维持待测元素的稳定性，从而大大提高了原子吸ｔｌ女：Ｎ定的精密度和准确度：表２石墨炉原子吸收光谱法测定血中铊的不同化学改进剂效果ｌ。测定试剂空白溶液（ｎ＝１２），计算方法检出限为Ｏ．２斗∥Ｌ：８．方法的准确度和精密度：取正常人血样分别加入１０、３０、５０ｖ。ｇ／Ｌ的铊标准溶液进行测定，回收率和精密度测定结果（重复测定７次计算相对标准偏差）分别为９８．０％．１０１．３％、１．８％一２．７％。见表３。对全血痕量元素标准物质进行分析，测定值为３３．８¨∥Ｌ＇标准值为（３４．１±６．９）斗∥Ｌ，测定结果在证书值范同内．表３石墨炉原子吸收光谱法测定血中铊的加标回收率和精密度（ｎ＝７）５．灰化温度和ｎ，－Ｊｌ＇自Ｊ的选择：灰化温度过高．将造成待测元素的损失，同时数据重复性变差；温度过低，将产生较大的背景吸收，无法准确扣除。通过绘制灰化温度一吸光度曲线来确定最佳灰化温度，见图１，当灰化温度大于ｌ０００℃时，样品的吸光度值开始降低。灰化时间的长短依基体性质和样品量而不同，当灰化时间大于２０Ｓ时，吸光度开始出现平台：因此，我们选择１０００℃、保持２０Ｓ进行灰化：９．实际应用：采用本法对５０名参加职业健康检查的工人血中铊进行测定。其结果均低于方法检出限（０．２ｔｘ扎）。１０．／Ｊ、结：血样经５％（Ｖ／Ｖ）硝酸沉淀蛋白质后，在标准系列中加入０．２％氯化钠作为基体匹配剂，以５斗ｌ胶体钯作为化学改进剂，石墨炉原子吸收光谱法直接测定血中铊含量。本方法具有简便快速、灵敏、准确、干扰少等优点，能满足血中铊含量的测定二万方数据主堡董垫里生塑些瘟苤查！！！垒生！旦笙丝鲞笙兰塑￡！ｉ！』！型旦∑ｇＱ！！！Ｐ堕！！垒匹！Ｑ！！！！！！：！！！型！：兰【５１李建伟，李家涛，周勤文，等．微波消解一石墨炉原子吸收光谱法测定全血中铝…．中围卫生检验杂志，２００９，１９（３）：５４７—６２０．［６】覃利梅，满延峰，韦国铭，等．石墨炉原子吸收光谱法直接测定血中的铊｜Ｊ１有江民族医学院学报，２０１３，３５（２）：１８３—１８．［７１董健，徐北霜。Ｆ秋菊，等全血铅的恒温消解一石墨炉原子吸收测定法［Ｊ］环境与健康杂志，２００５，２２（１）：５３—５４．（收稿日期：２０１５．１０—２４）参考文献…罗晓芳，刘佳，秦文华．血液中铊的石墨炉原子吸收光谱测定法［Ｊ】中华劳动卫生职业病杂志，２００９，２７（２）：１０５．Ｊ０６．［２］徐希娴，张雁林，关里，等．职业性及环境性铊中毒的Ｉ临床与卫生学研究回顾叭中罔工业医学杂志．２００９，２２（４）：３１０．３１２．【３Ｊ邱泽武，王嚣孙成文．铊中毒的现状与诊治新进展【Ｊ］．中国急救医学，２００８，２８（９）：８２２—８２３．【４】方亚敏，茅建人，朱圆圆．石墨炉原子吸收法测定生物样品中的铊【Ｊ］广东微量元素科学，２０１ｌ，１８（４）：５０—５３．（本文编辑：吴雪）尿中马尿酸、甲基马尿酸测定的乙腈萃取一高效液相色谱法丘静静阮小林吴邦华戎伟丰蒙瑞波【摘要】目的建立乙腈萃取前处理方法和高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法测定尿中马尿酸（ＨＡ）、甲基马尿酸（ＭＨＡ）？方法尿中ＨＡ、ＭＨＡ在酸性条件下用乙腈萃取，高效液相一二极管阵列检测器（ＨＰＬＣ—ＤＡＤ）检测，色谱条件：Ｃ．。柱（１５０ｍｉｎｘ４．６ｍｍ，５仙ｍ），以甲醇：０．２０％乙酸水溶液（含６．５ｍｍｏＹＬ磷酸二氢钾）（２５：７５，Ｖ／Ｖ）为流动相，流速为１ｍｌ／ｍｉｎ，波长为２５４ｎｍ。结果ＨＡ、２－甲基马尿酸（２－ＭＨＡ）、３－甲基马尿酸（３－ＭＨＡ）［４一甲基马尿酸（４一ＭＨＡ）］分别在９．９１．２关系良好，相关系数分别为０．９９９９７４．２０Ｉｘｇ／ｍｌ、１．９１～５７３．６０ＩＪ＿ｇ／ｍｌ、２．００—５９８．６５Ｉｘｇ／，ｎｌ线性９８、０．９９９８４、０．９９９８５；ＨＡ、２－ＭＨＡ、３－ＭＨＡ（４－ＭＨＡ）回收率分别为９６．３８％～９８．０１％、８３．１７％～９４．０５％、１０３．２２％。１０４．４５％，批内精密度相对标准偏差（ＲＳＤ）分别为０．５０％～１．２０％、０．５ｌ％～１．５９％、０．４９％～０．９５％，批间精密度ＲＳＤ分别为１．７０％～３．２０％、１．３０％～２．６７％、０．８６％～２．７４％，检出限分别为０．１８、０．４６、０．１２Ｉｘｇ／ｍｌ，最低检出浓度分别为Ｏ．３６、Ｏ．９２、０．２４Ｉｘｇ／ｍｌ（以尿样１ｍｌ计）；样品在４ｃ｜Ｃ冰箱中可保存１５ｄ。结论乙睛萃取尿中ＨＡ、ＭＨＡ前处理方法简单易行，符合ＧＢＺ／Ｔ２１０．５．２００８《职业卫生标准制定指南第５部分：生物材料中化学物质测定方法》的相关要求，可用于职业接触甲苯、二甲苯人群尿中ＨＡ、ＭＨＡ的测定。【关键词】色谱法，高压液相；马尿酸；甲基马尿酸；尿Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｈｉｐｐｕｒｉｃａｃｉｄａｎｄｍｅｔｈｙｌｈｉｐｐｕｒｉｃａｃｉｄｉｎｕｒｉｎｅｂｙｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙａｆｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｅｄ丽ｔｈＭｅｎｇＲｕｉｂｏ．ＧｕａｎｇｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅ５１０３００，ＣｈｉｎａａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅＱｉｕＪｉｎｘｉｎｇ，ＲｕａｎＨｏｓｐｉｔａｌｆｏｒＯｃｃｕｐａｔｉｏｎａｌＤｉｓｅａｓｅｓＸｉａｏｌｉｎ，ＷｕＢａｎｇｈｕａ，ＲｏｎｇＷｅｉｆｅｎｇ，ＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎａｎｄＴｒｅａｔｍｅｎｔ，ＧｕａｎｇｚｈｏｕＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆｈｉｐｐｕｒｉｃａｃｉｄ（ＨＡ）ａｎｄｍｅｔｈｙｌ—ｈｉｐｐｕｒｉｅａｃｉｄ（ＭＨＡ）ｉｎｕｒｉｎｅａｎｄＨＰＬＣｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＨＡａｎｄＭＨＡｉｎｕｒｉｎｅｗｅｒｅｅｘｔｒａｃｔｅｄｗｉｔｈａｅｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｃｔｉｖｅｕｎｄｅｒａｃｉｄｃｏｎｄｉｔｉｏｎａｎｄｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｅｄｂｙＨＰＬＣ—ＤＡＤ．ＴｈｅｏｐｅｒａｔｉｎｇｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｂｙＨＰＬＣｍｍｘｗｅｒｅＣｌＲｃｏｌｕｍｎ（１５０４．６ＩＢｍ，５“ｍ），ｍｅｔｈａｎｏｌ一０．２％ａｃｅｔｉｃａｃｉｄ（ｃｏｎｔａｉｎｅｄ６．５ｍｍ０１／Ｌｐｏｔａｓｓｉｕｍｄｉｈｙｄｒｏｇｅｎｐｈｏｓｐｈａｔｅ）（２５：７５，Ｖ／Ｖ）ａｓｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅ，ｌｍｌ／ｍｉｎａｓｆｌｏｗｒａｔｅａｎｄｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓａｔ２５４ＲＥ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｓｔａｎｄａｒｄｃｕｒｖｅｓｆｏｒＨＡ，２一ＭＨＡａｎｄ３－ＭＨＡ（４一ＭＨＡ）ｓｈｏｗｅｄｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｉｔｙｂｅｔｗｅｅｎ９．９１—２９７４．２０斗ｇ／ｍｌ（ｒ＝０．９９９９８），１．９１～５７３．６０ｕｇ／ｍｌ（ｒ＝０．９９９８４）ａｎｄ２．００一－５９８．６５Ｉｘｇ／ｍｌ（ｒ＝０．９９９８５）。ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｍｅａｎｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｗｅｒｅ９６．３８％～９８．０ｌ％．８３．１７％～９４．０５％，１０３．２２％～１０４．４５％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｗｉｔｈｉｎ—ｒｕｎｐｒｅｃｉｓｉｏｎｗｅｒｅ０．５０％～ｌ＿２０％．０．５ｌ％．１．５９％．０．４９％～０．９５％．ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄｔｈｅｂｅｔｗｅｅｎ．１ｕｎｐｒｅｃｉｓｉｏｎｗｅｒｅ１．７０％～３．２０％，１．３０％一２．６７％。０．８６％～２．７４％．ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＴｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｌｉｍｉｔｏｆＨＡ，２一ＭＨＡａｎｄ３－ＭＨＡ（４一ＭＨＡ）ｗｅｒｅ０．１８Ｉｘｇ／ｍｌ，０．４６斗ｇ，ｍｌ０．１２Ｉｘｇ／ｍｌ，ａｎｄｔｈｅｌｏｗｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｔｈｅｍｅｔｈｏｄｗｅｒｅ０．３６Ｉｘｇ／ｍｌ，０．９２Ｉｘｇ／ｍｌａｎｄ０．２４“∥ｍｌ（１ｍｌｕｒｉｎｅ）．Ｔｈｅｕｒｉｎｅｃａｎｂｅｋｅｐｔ１５ｄａｙｓａｔ４℃ｒｅｆｒｉｇｅｒａｔｏｒｗｉｔｈｏｕｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｌＯＳＳ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｉｓｍｅｔｈｏｄｗｉｔｈｓｉｍｐｌｙｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｃｏｎｆｏｒＩＢＳｔｏｔｈｅｒｅｌｅｖａｎｔｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓｏｆｇｕｉｄｅｆｏｒｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇａｎｄｏｅｅｕｐａｔｉｏｎａｌｈｅａｌｔｈｓｔａｎｄａｒｄｓ—ｐａｒｔ５：ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｏｆｃｈｅｍｉｃａｌｓｉｎｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｍａｔｅｒｉａｌｓ．ＩｔｄｅｔｅｃｔＨＡａｎｄＭＨＡｉｎｕｒｉｎｅｆｏｒｏｃｃｕｐａｔｉｏｎａｌｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｅｘｐｏｓｕｒｅｔｏｔｏｌｕｅｎｅａｎｄｘｙｌｅｎｅ．ｃａｎｂｅｕｓｅｄｔｏ【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ｈｉｇｈｐｒｅｓｓｕｒｅｌｉｑｕｉｄ；Ｈｉｐｐｕｒｉｃａｃｉｄ；Ｍｅｔｈｙｌｈｉｐｐｕｒｉｃａｃｉｄ；ＵｒｉｎｅＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－９３９１．２０１６．０４．０２０基金项目：广东省职业病防治重点实验室（２０１２Ａ０６１４００００７）；广东省医学科学研究基金（Ａ２０１２０６７）作者单位：５１０３００广州，广东省职业病防治院，广东省职业病防治重点实验室万方数据