薄叶红厚壳根的化学成分研究(Ⅰ)

陈光英;吴晓鹏;戴春燕;赵军;韩长日;宋小平;钟琼芯

【摘 要】利用现代色谱分离技术对薄叶红厚壳Calophyllum membranaceum根的乙醇提取物氯仿部位进行分离纯化,得到8个化合物,分别鉴定为:木栓酮(Friedelin,Ⅰ)、海棠果醇(Canophyllol,Ⅱ)、木栓醇(Epi-friedelinol,Ⅲ)、3,4-二羟基苯甲酸(3,4-dihydroxybenzoic acid,Ⅳ)、穗花杉双黄酮(Amentoflavone,Ⅴ)、7-羟基香豆素(7-dihydroxycoumarin,Ⅵ)、紫花前胡苷(btarmesinin,Ⅶ)、紫花前胡昔元(Nodakenetin,Ⅷ).其中化合物Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ为首次从该植物中分离得到. 【期刊名称】《中山大学学报（自然科学版）》 【年(卷),期】2009(048)004 【总页数】5页(P52-56)

【关键词】藤黄科;薄叶红厚壳;化学成分

【作 者】陈光英;吴晓鹏;戴春燕;赵军;韩长日;宋小平;钟琼芯

【作者单位】海南师范大学化学系//海南省热带药用植物化学重点实验室,海南海口571158;中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口571101;海南师范大学化学系//海南省热带药用植物化学重点实验室,海南海口571158;海南师范大学化学系//海南省热带药用植物化学重点实验室,海南海口571158;海南师范大学化学系//海南省热带药用植物化学重点实验室,海南海口571158;海南师范大学化学系//海南省热带药用植物化学重点实验室,海南海口571158;海南师范大学化学系//海南省热带药用植物化学重点实验室,海南海口571158

【正文语种】中 文 【中图分类】R284.1

薄叶红厚壳Calophyllum membranaceum Gardn. et Champ. 为藤黄科、红厚壳属常绿乔本植物。红厚壳属植物有很高的药用价值，可以用作防腐剂、收敛剂、祛痰剂、利尿剂、催泻剂和抗病毒感染药，种子和根的油常用来治疗伤口和疥疮。自从1992年美国癌症研究中心的Kashman等[1]从马来西亚热带树林藤黄科红厚壳属植物C.lanigerum中分离出具有抗艾滋病病毒活性的香豆素化合物

Calanolides以来，对红厚壳属植物的化学成分研究引起了人们广泛的兴趣。国内外学者已从该属植物中分离出了香豆素类[2]、黄酮类[3]、酮[4]、三萜类[5]等具有生物活性的化合物。为了更好地开发利用海南药用植物资源，本课题组在对薄叶红厚壳叶的化学成分研究的基础上[6]，进一步对薄叶红厚壳的根进行了系统的化学成分研究，

作者从采自海南陵水县薄叶红厚壳根的乙醇提取物氯仿部位中分离鉴定了8个化合物：木栓酮(Ⅰ)、海棠果醇(Ⅱ)、木栓醇(Ⅲ)、3,4-二羟基苯甲酸(Ⅳ)、穗花杉双黄酮(Ⅴ)、7-羟基香豆素(Ⅵ)、紫花前胡苷(Ⅶ)和紫花前胡苷元(Ⅷ)。其中化合物Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ为首次从该植物中分离得到。据文献报道，香豆素类化合物具有抗癌等多种药理活性，其中紫花前胡苷和紫花前胡苷元具有抗血小板凝聚作用[7]。7-羟基香豆素对人的恶性肿瘤细胞具有抑制作用以及对扁豆蚜和淡色库蚊具有较好的杀虫活性[8-9]。 1 结果与讨论

化合物Ⅰ 白色针晶，易溶于氯仿，θmp 262～263 ℃；TLC检视，喷φ=5%的硫酸-乙醇溶液，110 ℃显紫红色，逐渐变为蓝黑色；Liebermann-Burchard反应

呈阳性，提示可能为萜类化合物。1H-NMR(400 MHz,CDCl3)δ：

0.72,0.87,0.96,1.00,1.03,1.05,1.18(each 3H,s,Me),0.88(3H,d,J=6.68 Hz)，此为三萜类化合物的特征信号，将以上数据同文献[6]比较，氢谱数据基本一致，故化合物I鉴定为木栓酮(Friedelin)。

化合物Ⅱ 白色针晶，易溶于氯仿，θmp 280～281℃； 1H-NMR(400

MHz,CDCl3)显示在δ 0.72 ～1.12之间有6个单峰甲基(δ 0.72, 0.86, 0.91, 0.97, 0.99, 1.12)和1个双峰甲基(δ 0.88, d, J = 6.0 Hz)，提示该化合物可能是萜类化合物；同时δ 3.63 (2H,s)提示该化合物还含有羟甲基，将上述数据同文献[6]对照，氢谱数据一致；再将此化合物同本课题组以前从薄叶红厚壳叶中分离到的海棠果醇共TLC检视，三种不同的溶剂系统进行展开，喷5%的硫酸-乙醇溶液，110 ℃显色，发现两者Rf值及显色情况一致，故化合物Ⅱ鉴定为海棠果醇(Canophyllol)。 化合物Ⅲ 白色针晶，易溶于氯仿，θmp 271～272 ℃；TLC检视，喷φ=5%的硫酸-乙醇溶液，110 ℃显紫红色，逐渐变为蓝黑色。1H-NMR(400 MHz,CDCl3)显示在δ 0.72 ～1.17之间有7个单峰甲基(δ 0.86, 0.95, 0.98, 0.98, 1.00, 1.01, 1.17)和1个双峰甲基(δ 0.94, d, J = 7.3 Hz)，提示该化合物可能是萜类化合物；δ 3.73(1H,d , J = 2.4 Hz)， 9.48(1H,s)提示该化合物的次甲基上有1个羟基存在。将上述数据同文献[10]对照，氢谱数据基本一致，故化合物Ⅲ鉴定为木栓醇(Epi-friedelinol)。

化合物Ⅳ 白色结晶，易溶于丙酮，θmp 199～200 ℃；ESI-MS(negative mode)m/z：153[M-H]-；1H-NMR(400 MHz,CD3COCD3)中只显示1组ABX偶合系统信号δ 7.47(1H,d,J=2.2 Hz)，7.34(1H,dd,J=2.2,8.2Hz)和

6.77(1H,d,J=8.2 Hz)，提示该苯环上3个取代基均含有活泼氢。将上述数据与文献[11]对照，确定化合物Ⅳ为3，4-二羟基苯甲酸(3,4-dihydroxybenzoic acid)。 化合物Ⅴ 黄色针晶(甲醇)，θmp 246～248 ℃，紫外灯365 nm下呈黄色，Zn-

浓HCl显色反应呈阳性，提示该化合物为黄酮类化合物。ESI-MS(positive mode)m/z:539[M+H]+；1H-NMR(400 MHz,CD3COCD3)显示出12个芳香质子信号δ 6.21(1H,d,J=1.5 Hz),6.35(1H,s),6.44(1H,d,J=1.5

Hz),6.62(1H,s),6.70(1H,s),6.77(2H,dd,J=2,6.5 Hz),7.15(1H,d,J=9 Hz), 7.68(2H,dd,J=2,6.5 Hz), 7.96(1H,dd,J=2.5,9 Hz),8.21(1H,d,J=2.5 Hz)，提示此化合物可能为双黄酮类化合物；其中6.21(1H,d,J=1.5 Hz)和6.44(1H,d,J=1.5 Hz)相互偶合，此信号归属于其中一个黄酮单元的6位和8位；7.15(1H,d,J=9 Hz),7.96(1H,dd,J=2.5,9 Hz),8.21(1H,d,J=2.5 Hz)构成1个ABX偶合系统，6.77(2H,dd,J=2,6.5 Hz)和7.68(2H,dd,J=2,6.5 Hz)则构成1个AA′BB′偶合系统，这2个偶合系统分别归属于两个黄酮单元的B环；13.06(1H,s)和13.19(1H,s)给出两个典型的黄酮类化合物的5-OH质子信号。将上述数据同文献[6]对照，氢谱数据一致；再将此化合物同本课题组以前从薄叶红厚壳叶中分离到的穗花杉双黄酮共TLC检视，喷Zn-浓HCl溶液显色，发现两者Rf值及显色情况一致，故化合物Ⅴ鉴定为穗花杉双黄酮(Amentoflavone)。

化合物Ⅵ 白色粉末，易溶于DMSO，θmp 225～227 ℃，365 nm紫外灯下显蓝色荧光，1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6 )显示只有5个芳香质子信号δ6.17(1H,d,J=9.3 Hz),7.90(1H,d,J= 9.3 Hz)，7.49(1H,d,J=8.4 Hz)，6.75(1H, dd,J=8.4，2.2 Hz)，6.68(1H,d,J=2.2 Hz)和1个活泼氢的信号10.5(1H,br.s)；其中δ 6.17(1H,d,J=9.3 Hz), 7.90(1H,d,J=9.3 Hz)构成AB偶合系统，这是典型的香豆素类化合物3位和4位氢信号；δ7.49(1H,d,J=8.4 Hz)，6.75(1H,dd,J=8.4，2.2 Hz)和6.68(1H,d,J=2.2 Hz)则构成ABX偶合系统。将上述数据同文献[12]对照，氢谱数据一致；故推出此化合物为7-羟基香豆素(7-hydroxycoumarin)。 化合物Ⅶ 白色粉末，易溶于DMSO，θmp 255～257 ℃，365 nm紫外灯下显蓝色荧光,Molish反应阳性，提示此化合物可能为糖苷类化合物；1H-NMR(400

MHz，DMSO-d6)显示出4个芳香质子信号，δ 6.22(1H,d,J=9.5 Hz)，7.95(1H,d,J=9.5 Hz)构成AB偶合系统，这是典型的香豆素类化合物3位和4位氢信号；δ7.49(1H,s)和6.82(1H,s)说明香豆素结构上的6位和7位均被取代；4.41(1H,d,J=7.8 Hz)为糖端基碳上的质子信号；13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)显示δ7.3为端基糖碳的信号；将以上光谱数据与文献[13]比较,发现两者光谱数据一致，故推出此化合物为紫花前胡苷(Marmesinin)。

图1 化合物Ⅰ～Ⅷ的结构式Fig.1 Chemical structures of compounds I-Ⅷ 化合物Ⅷ 白色粉末，易溶于DMSO，θmp 189～191 ℃，365 nm紫外灯下显蓝色荧光,Molish反应阴性；1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6 )显示出与上述紫花前胡苷元基本相同的数据，将以上数据与文献[14]值对照，发现两者光谱数据一致；同时将此化合物与紫花前胡苷的水解产物共TLC，发现两者的Rf值及显色情况一致，所以确定化合物Ⅷ为紫花前胡苷元(Nodakenetin)。 2 实验部分

2.1 仪器，试剂和样品

熔点仪：浦光数字熔点仪WRS-1B型:上海浦东物理光学仪器厂:温度未校正；核磁共振仪：Bruker AV-400型；质谱仪：Finnigan LC-MS；红外光谱仪：Nicolet Nexus670FT-IR型红外分光光度计；旋转蒸发仪及中压液相：瑞士BüCHI公司；紫外： HITACHI U-2800。

高效液相： Waters 2695 Alliance Empower色谱工作站；Sephadex LH-20(Pharmacia)。

薄层板GF254：Merck公司；柱层析硅胶：青岛海洋化工厂。

薄叶红厚壳采自海南陵水县，经海南师范大学生物系钟琼芯副教授鉴定为薄叶红厚壳根(Calophyllum membranaceum Gardn. et Champ.)，标本存于海南省热带药用植物化学重点实验室。

2.2 提取与分离

干燥的薄叶红厚壳根，粉碎，用φ=70%的乙醇回流提取3次，每次1 h，减压回收乙醇至无醇味的浸膏。加入适量的水混悬后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到相应的各个部位，然后取氯仿部位反复经正相柱色谱、反相柱色谱和Sephadex LH-20层析等方法分离纯化，得到化合物Ⅰ～Ⅷ。 2.3 物理常数与波谱解析

化合物Ⅰ 白色针晶，易溶于氯仿，θmp 262～263 ℃；1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：0.72,0.87,0.96,1.00,1.03,1.05,1.18(each 3H,s,Me),0.88(3H,d,J=6.68 Hz)。

化合物Ⅱ 白色针晶，易溶于氯仿，θmp 280～281 ℃； 1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ:0.72 和0.86 (each 3H,s,H-24 ,25) ,0.88 (3H ,d , J = 6.0 Hz,H-23),0.91,0.97,0.99 和1.12 (each 3H,s,H-27,26,29,30) ,3.63 (2H,s,H-28)。 化合物Ⅲ 白色针晶，易溶于氯仿，θmp 271～272 ℃；1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ:0.86,0.94,0.95,0.98,0.98,1.00,1.17(each 3H,s,H-25,24,26,29,2728,30),0.94(3H,d, J= 7.3 Hz,H-23),3.73(1H,d, J=2.4 Hz,3α-H),9.48(1H,s,3 -OH)。

化合物Ⅳ 白色结晶，易溶于丙酮，θmp 199～200℃；ESI-MS(negative mode)m/z: 153[M-H]-；1H-NMR(400 MHz，CD3COCD3)δ:7.47(1H,d, J = 2.2 Hz,2-H),7.34(1H,dd, J=2.2,8.2 Hz,6-H),6.77(1H,d, J=8.2 Hz,5 -H)。 化合物Ⅴ 黄色针晶，易溶于甲醇 , θmp 246～248 ℃；ESI-MS(positive mode)m/z: 539[M+H]+;1H-NMR(400 MHz,CD3COCD3 )δ:6.21(1H,d, J =2.5 Hz, H-6) ,6.35 (1H,s , H-6″) ,6.44 (1H ,d , J =1.5 Hz,H-8),6.62 (1H,s, H-3″) ,6.70 (1H,s, H-3),6.77 (2H ,dd , J=2 ,6.5 Hz,H-3″′,5″′), 7.15 (1H,d, J =9 Hz, H-5′), 7.68 (2H,dd, J =2,6.5 Hz, H-2″′,6″′), 7.96(1H,dd, J =2.5, 9 Hz,H-6′) ,

8.21(1H,d, J =2.5 Hz, H-2′), 13.06 (1H,s, OH-5),13.19 (1H, s, OH-5′) 。 化合物Ⅵ 白色粉末，易溶于DMSO，θmp 225～227 ℃，365 nm紫外灯下显蓝色荧光, 1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6 )δ: 6.17 (1H,d,J=9.3 Hz,3-H), 7.90 (1H,d, J = 9.3 Hz,4-H ),7.49 (1H,d,J=8.4 Hz,5-H),6.75(1H,dd, J=8.4,2.2 Hz,6-H),6.68(1H,d,J=2.2 Hz,8-H),10.5(1H,br.s,7-OH)。

化合物Ⅶ 白色粉末，易溶于DMSO，θmp 255～257 ℃，365 nm紫外灯下显蓝色荧光, 1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6 )δ: 6.22(1H, d, J = 9.5 Hz, H-3),7.95(1H, d, J =0.5 Hz ,H-4),7.49(1H, s, H-5),6.82(1H, s, H-8), 4.41(1H,d, J = 7.8 Hz, Glu-1)。

13C-NMR(100 MHz ,DMSO-d6)δ: 160.5(C-2),112.2(C-3),144.7(C-4),123.9(C-5),125.6(C-6),163.1(C-7),96.2(C-8),155.0(C-9), 112.2(C-10), 90.1(C-2′), 28.8(C-3′),76.8(C-4′),23.1,21.8(gem-CH3),97.3(Glu-1),73.5(Glu-2),76.5(Glu-3),70.0(Glu-4),76.9(Glu-5),60.84(Glu-6)。

化合物Ⅷ 白色粉末，易溶于DMSO，θmp 189～191 ℃，365 nm紫外灯下显蓝色荧光, 1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6 )δ: 6.22 (1H, d, J= 9.5 Hz,3-H), 7.95(1H,d,J=9.5 Hz,4-H),7.49(1H,s,5-H),6.82(1H,s,8-H),4.70(1H,t,J =6.6 Hz,2′-H),3.27(2H,d,J=9.0 Hz, 3′-H),1.13,1.15(each 3H,S, 5′,6′-H)。 参考文献：

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