酶解法提取银耳多糖的工艺及稳定性研究

食品研究与开发　基础研究　ＤＯＩ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１００５－６５２１．２０１５．１１．００４　Ｆｏｏｄ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ａｎｄ　Ｄｅｖｅｌｏｏｍｅｎｔ　２０１５年６月　第３６卷第１１期　ｉ７＝　酶解法提取银耳多糖的工艺及稳定性研究　鲍会梅　（江苏食品药品职业技术学院食品与营养工程学院，江苏淮安２２３００３）　摘要：为了对银耳多糖进行深加工，本文优化了酶解法提取银耳多糖的提取条件。酶解法最高提取率为１５．３６％，　回收率９７．３％，精密度１．２％，最佳条件为：纤维素酶１．５％，纤维素酶０．５％，中性蛋白酶２．０％，温度５０￣Ｃ，ｐＨ４．５，时　间６０ｍｉｎ。通过试验证明温度、ｐＨ对多糖提取液影响极小，提取液具有良好的稳定性。白砂糖对提取液有促进作用，　乳酸反之。酶解法是一种条件温和、节约能耗、提取率高的提取方法。　关键词：银耳；多糖；提取；影响因素　Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　Ｔｒｅｍｅｌｌａ　Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｂｙ　Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　Ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ　ＢＡＯ　Ｈｕｉ—ｍｅｉ　（Ｊｉａｎｇｓｕ　ｆｏｏｄ　ａｎｄ　ｄｒｕｇ　ｏｆ　Ｃａｒｅｅｒ　Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ＣｏＢｅｇｅ　ｏｆ　ｆｏｏｄ　ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｎｕｔｉｒｔｉｏｎａｌ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｈｕａｉ＇ａｎ　２２３００３，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ　ｄｅｅｐ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ｏｆ　ｔｒｅｍｅｌｌａ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ．Ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ，ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｒｅｍｅｌｌａ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ．Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　１５－３６％，出ｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｒａｔｅ　ｏｆ９７．３％，ｔｈｅ　ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ　ｏｆ　１．２％，小ｅ　ｂｅｓｔ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ：ｃｅｌｌｕｌａｓｅ　１．５％，０．５％　ｃｅｌｌｕｌａｓｅ　ａｎｄ　２．０％ａｃｉｄ　ｐｒｏｔｅａｓｅ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　５０℃，ｐＨ４．５，ｔｉｍｅ　ｆｏｒ　６０　ｍｉｎ．Ｔｈｒｏｕｇｈ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｐＨ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｅｘｔｒａｃｔ，ｅｘｔｒａｃｔ　ｈａｓ　ａ　ｇｏｏｄ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ．Ｓｕｇａｒ　ｈａｓ　ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔ，ｌａｃｔｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｖｉｃｅ．Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ．ｉｓ　ａ　ｋｉｎｄ　ｏｆ　ｍｉｌｄ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｏｆ　ｓａｖｉｎｇ　ｅｎｅｒｇｙ　ｃｏｎｓｕｍｐｔｉｏｎ，ｈｉｇｈ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｙｉｅｌｄ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｔｒｅｍｅｌｌａ；ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｉｍｐａｃｔ　银耳多糖是银耳中的功能性成分，具有活性作　本文对水提法、碱提法、酶解法３种提取多糖的　方法进行比较，得出最佳提取方法是酶解法，并对影　响酶解法提取多糖的影响因素进行探讨，得到提取的　用，无甜味，易溶于热水［Ｉ】，且水溶液有旋光性，无变旋　现象。银耳多糖具有多种功能，如提高机体免疫力，抗　肿瘤作用，降血糖、降血脂、降血压作用，抗疲劳、抗衰　老作用，抗病毒作用，抗氧化作用等。　近ｌＯ多年来，许多学者围绕食用菌的营养成分、　功能因子、保健功效等方面进行了研究［２１。对于银耳的　种植、提取、纯化等发面已有了部分研究，但银耳功能　成分多糖并未得到广泛深入的研究，其利用开发也是　少之又少。银耳多糖拥有广阔的市场，不仅具有较高　的营养价值，而且还具有一定的医疗保健功能和巨大　最佳条件。通过试验分析温度、ｐＨ对多糖提取液的稳　定性影响，再分析不同添加量的白砂糖、乳酸对提取　液黏度的影响。　１材料与方法　１．１材料与设备　１．１．１原料　银耳：购于淮安市苏果超市。　１．１．２试剂　的药用价值，其功能特性越来越受到关注，故而我们　很有必要加大对银耳多糖的开发利用，实现其商品　价值［３］。　作者简介：鲍会梅（１９７４一），女（汉），副教授，硕士，主要从事食品　理化检验技术教学工作。　果胶酶；纤维素酶；中性蛋白酶；三氯乙酸；氢氧　化钠溶液；乙醇；磷酸盐缓冲溶液；白砂糖；乳酸；柠檬　酸等。以上试剂购自于南京化学试剂股份有限公司，　均为分析纯。　鲍会梅：酶解法提取银耳多糖的工艺及稳定性研究　基础研究　＿＝＝　８　１．１．３仪器　ＩＦＭ一１００高速粉碎机：上海蒙特工业自动化有限　公司；Ｒ一２０１真空旋转蒸发仪：北京中西泰安技术服务　有限公司；ＵＶ２１００型紫外可见分光光度计：上海仪托　环保仪器有限公司；ＮＤＺ一７９旋转式黏度计：上海方瑞　仪器有限公司；ＢＳＺ１００自动部分收集器：苏州江东精　密仪器有限公司；雷磁ＰＨＳ一３Ｃ精密ｐＨ计：上海精密　科学仪器有限公司。　１．２方法　１．２．１热水提取法　银耳磨碎成粉按体积比１：６０加水，置于８０ｑＣ水浴　中恒温提取４ｈ，过滤，滤渣用相同方法水提２次，合并水　提液。浓缩，加三氯乙酸除蛋白。离心，取上清液，定容。　１．２．２碱提取法　银耳磨碎成粉按体积比１：１００加入１　ｍｏｌ／Ｌ氢氧　化钠溶液，置于８０℃水浴中提取４　ｈ，过滤，稀碱提取　液经中和、浓缩后，加三氯乙酸除蛋白，浓缩、定容。　１．２．３酶解提取法　银耳磨碎成粉按体积比１：８０加水，调至ｐＨ６．６，　加入１．５％的复合酶（中性蛋白酶、纤维素酶、果胶　酶），置于４０℃水浴中恒温酶促反应４　ｈ，迅速升温至　８０℃灭酶，恒温提取１　ｈ，过滤，滤液浓缩后加人３倍　体积９５％乙醇静置过夜。离心，弃上清液，沉淀加水溶　解，三氯乙酸除蛋白，定容　。　通过对热水提取法、碱提取法和酶碱提取法的比　较，得出酶解提取法的提取效果最好，故而下面对酶　解提取法的提取条件进行探讨。　１．２．４酶添加量对多糖提取率的影响　精密称取银耳粉２．０　ｇ（６份），加入ｐＨ５．０的磷酸　盐缓冲液各２０　ｍＬ，分别加入０．６…０　９　１．２、１．５、１．８、２．１％　的复合酶（中性蛋白酶、果胶酶和纤维素酶），在５０℃　下水浴７０　ｍｉｎＮ，以多糖提取率为指标，确定复合酶的　最佳用量。　１．２．５　ｐＨ对多糖提取率的影响　精密称取银耳粉２．０　ｇ（６份），分别加入ｐＨ３．０、　３．５、４．０、４．５、５．０、５．５的磷酸盐缓冲液２０　ｍＬ，并加人　１．２．４中最佳用量的复合酶，在５０℃下水浴７０　ｍｉｎ［￣，　以多糖提取率为指标，确定多糖提取的最佳ｐＨ。　１．２．６温度对多糖提取率的影响　精密称取银耳粉２．０　ｇ（５份），加入１．２．５中最佳　ｐＨ的磷酸和磷酸钠缓冲液各２０　ｍＬ，并加入１．２．４中　最佳用量的复合酶，分别在１０、３０、５０、７０、９０℃下水浴　７０　ｍｉｎ［￣，以多糖提取率为指标，确定多糖提取的最佳　温度。　１．２．７提取时间对多糖提取率的影响　精密称取银耳粉２．０　ｇ（５份），加入ｐＨ５．０的柠檬　酸和柠檬酸钠缓冲液各２０　ｍＬ，并加入１．２．４中最佳用　量的复合酶，分别在２．２．６中的最佳温度下分别水浴　２０、４０、６０、８０、１００　ｍｉｎ，以多糖提取率为指标，确定多　糖提取的最佳时间　。　１．２．８复合酶配比的正交实验设计　以上述影响３种酶的最佳温度、最佳ｐＨ和最佳　提取时间，以不同质量百分比的纤维素酶、果胶酶、中　性蛋白酶的不同酶用量设计正交实验，确定复合酶的　最佳配比。实验因素水平设计如表ｌ所示。　表１复合酶配比正交实验因素水平表　Ｔａｂｌｅ　１　Ｔｈｅ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　ｅｎｚｙｍｅｓ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｆａｃｔｏｒ　ｌｅｖｅｌ　ｔａｂｌｅ　１．２．９复合酶提取工艺正交实验设计　按照最佳复合酶配比的实验结果，加入最佳配比　的纤维素酶、果胶酶和中性蛋白酶，以提取温度、提取　时ｐＨ和提取时间为因素，进行正交实验。实验因素水　平设计如表２所示。　表２复合酶提取因素正交实验因素水平表　Ｔａｂｌｅ　２　Ｃｏｍｐｏｕｎｄ　ｅｎｚｙｍｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｆａｃｔｏｒｓ　ａｎｄ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ｆａｃｔｏｒｓ　１．２．１０多糖提取液的稳定性实验　将上述酶解提取法中的银耳多糖提取液经过精　滤、浓缩、防腐制成银耳多糖提取液成品，再讨论温度　和ｐＨ对多糖提取液的影响。　温度对多糖提取液稳定性的影响：分别将银耳多　糖提取液放置于５　ｑＣ条件下２个月，２５。【＝条件下２个　月，３９℃条件下２个月，５　ｃ【＝和３９　ｃＩ＝每２４小时交替一　次（持续２个月），放置结束后恢复到温度２０℃时检测　银耳多糖提取液的多糖质量浓度、ｐＨ、吸光度（波长　４００　ｎｍ）和黏度等理化指标［８１，判断其在不同温度下的　热稳定性，从而证明多糖产品能够长期储存。　ＤＨ对多糖提取液稳定性的影响：室温下，通过加　入柠檬酸溶液或ＮａＯＨ溶液将银耳多糖提取液的ｐＨ　调节至４．５、５．５、６．５、７．５、８．５、９．５、１０．５分别检测在各个　ｐＨ条件下银耳多糖提取液的多糖质量浓度、吸光度　（波长４００　ｎｍ）和黏度等理化指标［９１，从而判断其酸碱　稳定性。　基础研究　鲍会梅：酶解法提取银耳多糖的工艺及稳定性研究　ｉ９＝＝－　１．２．１　１添加剂对银耳提取液黏度的影响　在银耳多糖产品生产过程中，由于会添加白砂　糖、乳酸，其加入可能会改变银耳提取液的黏度，从而　影响银耳多糖产品的质量。因此，将白砂糖、乳酸对银　耳提取液的黏度影响进行了试验ｆｌ研。　１６　ｌ４垂　酶添加量，％　图１酶添加量对多糖提取率的影响　Ｆｉｇ．１　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｅｎｚｙｍｅ　ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｑｕａｎｔｉｔｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　白砂糖添加量对多糖提取液黏度的影响：取５份　１．２．１０所述的银耳多糖提取液成品，分别加人５、１０、１５、　２０、２５　ｇ白砂糖。样品经搅拌静置后，在３０　ｑｃ下进行测　定，以银耳多糖提取液的黏度作为指标，从而判断白砂　糖对银耳多糖提取液有何影响，同时进行空白试验。　乳酸添加量对多糖提取液黏度的影响：取５份　１．２．１０所述的银耳多糖提取液成品，分别加入０．５、１．０、　１．５、２．０、２．５　ｍＬ乳酸。样品经搅拌静置后进行测定，以　银耳多糖提取液的黏度作为指标，从而判断乳酸对银　耳多糖提取液有何影响，同时进行空白试验。　２结果与分析　２．１水、碱、酶法提取多糖的比较　用热水提取法、碱提取法、酶解提取法提取银耳　多糖，根据多糖的提取率、回收率、误差绝对值、精密　度，将三者进行比较，结果见表３，并选出最优方法。　表３　３种提取多糖方法的比较　Ｔａｂｌｅ　３　Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　％　由表３可以看出，酶解法的提取率、回收率、精密　度均高于水提法和碱提法，酶解法的误差绝对值也略　低于水提法和碱提法，即酶解法为最佳提取方法。国　标中回收率的范围为８７．８％～１１０．８％，精密度小于　５．８％，酶解法符合国标标准，所以此方法可行。　另外，水提取的缺点是提取温度高，耗时长且效　率低，成本高，安全性低，而碱提取易破坏多糖的空　间结构及活性。酶解法具有条件温和、易去除杂质和　节约能耗等优点。　２．２酶添加量对多糖提取率的影响　由上述１．２．４的操作步骤进行实验，实验结果如　图１所示。　由图１可知，随着酶添加量的增加，多糖的提取　率逐渐增加，当酶添加量为１．８％时，多糖的提取率达　到最高，提取率为ｌ５．１５％。　２．３　ｐＨ对多糖提取率的影响　由上述１．２．５所述步骤进行实验，实验结果如图２　所示。　ｏｆ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｉ　萋　３．０　３．５　４．０　４．５　５．０　５．５　ｐＨ　图２　ｐＨ对多糖提取率的影响　Ｆｉｇ．２　ＥｆｆｅｃｔｏｆｐＨｏｎｔｈｅｒａｔｅｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　由图２可知，随着ｐＨ得升高，多糖的提取率也升　高，在ｐＨ为４．５时提取率略有下降趋势，ｐＨ为４，５　时，多糖提取率最高，提取率为１５．１３％。　２．４温度对多糖提取率的影响　由上述１．２．６的操作步骤进行实验，实验结果如　图３所示。　１６　１４薹　图３温度对多糖提取翠的影晌　Ｆｉｇ．３　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｎ　ｈｔｅ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　由图３可知，温度对多糖提取率的影响呈抛物线　形，温度对多糖提取率的影响较大，当温度达５０　ｏ【＝时　提取率最高，提取率为１５．１６％。　２．５提取时间对多糖提取率的影响　由上述１．２．７的操作步骤进行实验，实验结果如　图４所示。　由图４可知，在提取时间大于４０ｍｉｎ后，时间对　多糖提取率影响呈直线趋势，提取时间对多糖提取率　的影响不大，当提取时间为６０ｒａｉｎ时，提取率达到最　高，提取率为１４．９８％。　２．６酶法提取多糖的正交试验　根据单因素对多糖得率的影响，考虑到不同因素　鲍会梅：酶解法提取银耳多糖的工艺及稳定性研究　基础研究　＿＝＝２Ｄ　１６　１４　１２　１Ｏ　碎　８　６　４　２　０　图４提取时间对多糖提取率的影响　Ｆｉｇ．４　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｉｔｍｅ　ｏｎ　ｙｉｅｌｄ　ｏｆ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　和酶共同作用会影响多糖提取率，因此设计正交实　验，确定复合酶的最佳配比和最佳反应条件。　２．６．１复合酶酶量配比正交试验　采用三因素三水平的正交试验确定复合酶最佳　配比，分９组实验，分别选择不同质量百分比的纤维素　酶、果胶酶和中性蛋白酶的酶用量进行正交试验，结　果见表４。　表４复合酶配比正交试验结果分析　Ｔａｂｌｅ　４　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ　２　３　４　５　６　７　８　９　ｅｎｚｙｍｅ　ｋ　ｋ　ｂ　Ｒ　０，．　．，　　舯　钉　。　２，　一洲一　Ｋ．　４３．８９　４４．０９　４２．１０　Ｋ２　４４．２６　４３．０４　４３．０８　Ｋ３　４２３９　４３．４１　４５．３６　ｋ１　１４．６３　Ｈ　１４．７０　ｋ２　１４．７５　１４．３５　加　弱　１４．ｏｏ　勰　１４－３６　ｋ３　１４．１３　１４．４７　ｌ５．１２　Ｒ　Ｏ．６２　０＿３５　１．１２　如表４所示，从极差分析结果来看，影响酶解提　取法的各个因素的优先顺序为Ｃ＞Ａ＞Ｂ，最佳条件应为　Ａ２Ｂ　Ｃ，，即纤维素酶添加量为１．５％，果胶酶添加量为　０．５％，中性蛋白酶添加量为２．０％，银耳多糖的提取率　为１５．１７％。　２．６．２复合酶提取工艺正交试验　确定了复合酶的最佳配比，再考虑提取温度、提　取ｐＨ值和提取时间对银耳多糖提取率的影响，针对　这些因素，采用三因素三水平的正交试验确定反应的　最佳条件。分９组实验，加入最佳配比的复合酶，分别　在不同的温度、ｐＨ、时间条件下进行正交试验，结果见　表５。　表５复合酶提取工艺正交实验结果分析　Ｔａｂｌｅ　５　Ｒｅｓｕｌ酶维纤号一　～加添ｔｓ　ｏｆ　一　。ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｅｘｔ　。ｒａｃｔ●ｉｏｎ　２：ｐｒｏｃｅｓｓ　Ａ温度　Ｂ　ｐＨ　　　ｅｘｐｅｒｉ，：２　。　，２　。　ｍｅｎｔ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　ｅｎｚｙｍｅ　ａｎａｌｙｓｉ试验号　一３　Ｃ时间　３　ｓ　３　提取率　４３．１２　４３．２９　取一一　Ｈ　＝。Ｈ　ｍ　鹏　４２．¨　４０　１４＿３７　１４．４３　１４．１３　Ｏ＿３Ｏ　如表５所示，从极差分析结果来看，影响酶解提　取法的各个因素的优先顺序为Ａ＞Ｂ＞Ｃ，最佳条件应为　Ａ２Ｂ：Ｃ：，即提取温度为５０℃，ｐＨ为４．５，提取时间为　６０　Ｌ　ａｒｉｎ，银耳多糖的提取率为１５．３６％。　２．７多糖提取液的稳定性实验　２．７．１温度对提取液稳定性的影响　㈨　对上所述的银耳多糖的提取液进行热稳定性测　试，调至不同温度，测试其中ｐＨ、多糖质量浓度、吸光　度（波长４００　ｎｍ）和黏度，结果如表６所示。　表６温度对提取液稳定性的影响　Ｔａｂｌｅ　６　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　Ｏｌｌ　ｔｈｅ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｈｔｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　从表６可以看出，温度对银耳多糖提取液的ｐＨ　值、多糖质量浓度、吸光度和黏度影响都比较小。综合　测试的各项指标可知，银耳多糖提取液在很大的温度　范围内都是稳定的，所以银耳多糖产品可以长时间储　存而不变质。　２．７．２　ｐＨ对提取液稳定性的影响　对上所述的银耳多糖提取液进行酸碱稳定性测　试，调至不同ｐＨ，测试其中多糖质量浓度、吸光度（波　长４００　ｒｉｍ）、流动性和黏度，结果如表７所示。　：２　肼勰　基础研究　鲍会梅：酶解法提取银耳多糖的工艺及稳定性研究　２　＝＝Ｉ　表７　ｐａ对多糖提取液稳定性的影响　Ｔａｂｌｅ７　ＥｆｆｅｃｔｏｆｐＨｏｎｔｈｅ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙｏｆｔｈｅ　ｓ￣ｕｆｉｏｎｏｆ　提取液黏度呈下降趋势，对其造成不利影响。所以在　银耳的多糖产品加工过程中，为保证乳酸的添加不影　响产品的质量，乳酸的添加量偏小比较好。　３结论　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　银耳多糖的３种提取方法中，热水提取法提取率　最低，碱提取法提取法提取率较高，酶解提取法提取　率最高，绝对误差值最小，酶解法提取率为１２．１％，回　收率为９７－３％，精密度为１．２％，综上所述银耳多糖提　取的３种方法中酶解提取法为最佳方法。再对酶解提　从表７可以看出，在ｐＨ范围为４．５～ｌＯ．５时，银耳　多糖提取液的多糖质量浓度和流动性都未受到ｐＨ变　取法的影响因素进行探讨，得出酶解法的最佳提取　条件为：纤维素酶添加量为１．５％，纤维素酶添加量为　０．５％，中性蛋白酶添加量为２．０％，反应温度为５０℃，　化的影响，吸光度和黏度变化也比较小，所以综合测　试的各项指标可证明，银耳多糖的提取液在ｐＨ为　４．５～１０．５范围内具有良好的酸碱稳定性，可以应用于　各类ｐＨ范围的产品中，应用范围较为广泛。　２．８添加剂对多糖提取液黏度的影响　２．８．１　白砂糖添加量对多糖提取液黏度的影响　向银耳多糖提取液加入不同量的白砂糖，测定其　对提取液黏度的影响，结果如表８所示。　表８白砂糖增加量对提取液黏度的影响　Ｔａｂｌｅ　８　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｓｕｇａｒ　ｉｎｃｒｅａｓｅ　ｔ０　ｅｘｔｒａｃｔ　ｖｉｓｃｏｓｉｔｙ　ｐＨ为４．５，反应时间为６０　ｍｉｎ，银耳多糖的最高提取率　为１５．３６％。通过稳定性实验证明温度和ＤＨ对银耳多　糖的提取液的影响极小，可忽略不计，从而说明银耳　多糖的提取液具有良好的稳定性，可以广泛应用于各　类ｐＨ范围的银耳多糖产品中，并能保证产品在长期　存放过程中的稳定性。白砂糖对银耳多糖的提取液黏　度有提升作用，白砂糖的增加不影响银耳多糖提取液　的质量，在银耳多糖的产品中可根据产品口感的要求　向产品中加入适量的白砂糖。乳酸添加会降低提取液　的黏度，影响银耳多糖提取液的质量，在银耳多糖的　产品中要少加入乳酸以保证产品的质量。本文通过实　验为建立方便、高效的多糖提取途径提供了参考，为　银耳多糖的进一步开发利用提供了参考。　参考文献：　［１】魏国志，李国光，金梅红．银耳多糖的研究进展Ⅲ．香料香精化妆　从表８可以看出，随着白砂糖添加量的增加，提　取液黏度呈上升趋势，说明白砂糖并不会对其产生不　利影响，反而起到了促进作用。在银耳的多糖产品中　可根据产品的口感要求添加适量的白砂糖。　２．８．２乳酸添加量对多糖提取液黏度的影响　向银耳多糖提取液加入不同量的乳酸，测定其对　提取液黏度的影响，结果如表９所示。　表９乳酸增加量对黏度的影响　Ｔａｂｌｅ　９　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｌａｃｔｉｃ　ａｃｉｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｖｉｓｃｏｓｉｔｙ　ｉｎｃｒｅａｓｅ　品．２００８，４（２）：３３—３５　［２】李月梅．食用菌的功能成分与保健功效［Ｊ】．食品科学，２００５，２６（８）：　５１７－５２１　【３】陈岗．银耳多糖的功能特性及其应用［Ｊ］．中国食品添加剂，２００４，　２５（４）：１４４—１４８　【４］王金凤．木耳多糖提取工艺研究［Ｊ】．食品科学，２００４，２５（６）：１４３—１４６　【５】张明，李苗苗，卢惠．复合酶法提取板蓝根多糖工艺研究『Ｊ］．食品　科技．２００９．３４（１　１）：２０８—２１　１　［６】林敏，吴冬青，李彩霞．黑木耳多糖提取条件的研究［Ｊ１．河西学院　学报，２００４，２０（５）：８７—８９　【７］姜红，孙宏鑫，李晶，等．酶法提取黑木耳多糖叨．食品与发酵工业，　２００５，３１（２）：１４３－１４６　【８】何聪芬，赵进，董银卯，等．银耳多糖工业化提取工艺优化及护肤　功效研究［Ｊ］．日用化学工业，２０１０，４０（４）：２５９—２６２　［９】罗晶洁，来吉祥，何聪芬．银耳多糖提取工艺优化及稳定性研究　ｆＪ】．日用化学工业，２０１０，４０￣）：２５９—２６２　【１Ｏ】崔蕊静，李凤英，李春华．银耳多糖的提取及其在饮料中的应用　［Ｊ］．中国食用菌，２００３，２３（２）：３８—４１　从表９可以看出，随着乳酸添加量的增加，多糖　收稿日期：２０１３—１２—０３