牛布鲁氏菌病诊断方法的比较试验

中国畜牧兽医文摘２０１４年３０卷第６期　基础科学　牛布鲁氏菌病诊断方法的比较试验　杨正玉。王波‘李桂杰　（１．吉林市动物疫病预防控制中心，吉林吉林１３２０１３；２．吉林市饲料兽药监察所，吉林吉林１３２０１３）　［摘要］本试验对牛布氏杆菌病ＥＬＩＳＡ快速诊断试剂盒与血清学试管凝集试验（ＳＡＴ）、虎红平板凝集试验（ＲＢＴ）、补体　结合试验（ＣＦＴ）进行了临床应用比较。试验共检测８Ｏ份牛血清样品，试管凝集试验检出１　６份阳性，２份可疑样品；虎红平板凝　集试验检出ｉ８份阳性；ＥＬＩＳＡ方法检出１　７份阳性；补体结合试验检出１８份阳性　试验结果表明，ＥＬＩＳＡ方法与试管凝集试验的阳　性样品符合率为９４．１２％；与虎红平板凝集试验的阳性样品符合率为９４．４４％；与补体结合试验的阳性样品符合率为９４．４４％。　［关键词］牛布氏杆菌病ＥＬＩＳＡ　ＳＡＴ　ＲＢＴ　ＣＦＴ　牛布氏杆菌病是由流产布氏杆菌所引起的一种人畜共患的传　染病，是国际贸易检疫中必检的一种传染病。该病的潜伏期一般　为２周～６个月，以母牛流产为本病的主要临床症状，对养牛业的　危害很大。本病的病原体是流产布氏杆菌，人感染后表现为波浪　热、关节痛，群众称之为懒汉病。近些年来，随着养牛业的不断　３讨论　发展壮大，牛及其相关牛制品的调运越来越频繁，致使牛布氏杆　（１）本试验通过４种不同的方法对同一批样品进行布鲁氏　菌病疫情在一些地方有所抬头。　菌病的检疫，从检测的８０份牛血清样品结果看，ＥＬＩＳＡ检测方法　１材料与方法　和ＣＦＴ检测方法阳性样品符合率和阴性样品符合率分别为９４．４４％　（１）牛布氏杆菌病ＥＬＩＳＡ快速诊断试剂盒由哈尔滨平和生物　和９８．４１％。且ＥＬＩＳＡ方法结果判定排除人为因素干扰，客观、快　技术有限公司提供。　速、特异、灵敏，方法先进快速，结果客观可靠。　（２）试管凝集试验（ＳＡＴ）、虎红平板凝集试验（ＲＢＴ）、　（２）ＳＡＴ检测方法和ＥＬＩＳＡ检测方法的阳性样品符合率和阴　补体结合试验（ＣＦＴ）试验所用抗原、阳性血清均由中国兽药监　性样品符合率分别为９４．１２％和９８．４１％。试验结果表明试管凝集试　察所提供。　验仍然存在人为干扰因素，且试验过程繁琐且耗时长。　（３）受检血清来自本中心每月流调送检样品。　（３）ＲＢＴ检测方法和ＥＬＩＳＡ检测方法的阳性符合率和阴性符　（４）间接ＥＬＩＳＡ按牛布氏杆菌病ＥＬＩＳＡ快速诊断试剂盒方　合率分别为９４．４４％和９８．４１％。　法，具体步骤如下：包被好的抗原板　Ⅱ待检血清、阴性血清、　（４）目前，我国布鲁氏菌病常用的检测方法为ＢＰＡＴ，ＲＢＴ　阳性血清、对照，３７℃反应４０　ｍｉｎ一洗板一加酶标二抗，３７℃反　等血清学方法。但由于这些方法特异性及敏感性不高且存在人为　应３０　ｍｉｎ一洗板一加底物，３７℃反应ｌ５　ｍｉｎ一加终止液，在酶标　判定因素的干扰，因而对于初筛中阳性的样品需要通过流行病史　仪上读数，参照判定标准判定试验最后结果。　或临床症状且分离出布氏杆菌才能判为病畜，否则，需经过ＳＡＴ　（５）试管凝集试验、虎红平板凝集试验和补体结合试验均参　检测或Ｃ　ＦｒＩ’试验检测阳性才能判定为阳性畜。ＣＦ１方法因受试验条　照说明书所述方法进行。　件要求高等因素，一般基层兽医站难以进行，不易于推广。与其　２结果　他检测方法比较而言，ＥＬＩＳＡ方法特异性好，样品需求量少，整　ＥＬＩＳＡ、ＳＡＴ、ＲＢＴ、ＣＦＴ检测结果及４种方法的符合率比较详　个反应时间短，判定时用酶联免疫仪，避免了人为因素的干扰，　见表１。　使结果快速、准确，值得在生产实际中推广应用。　表１　ＥＬ　ｌ　ＳＡ、ＳＡＴ、ＲＢＴ、ｅＦＴ检测结果及比较　（上接第５４页）　ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｂｈＫ’ｋｓ　ｔｒａｎｓｆｏｒｍａ－－ｔｉｏｎ　ｂｙ　ｃ—ｍｙｃ　ｗｉｔｈｏｕｔ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ　ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，２００８，（１３５）　２４５５—２４６５．　ｃｅｌｌ　ｒｏｗｔｈ［ｇＪ］．Ｂｉｏ，２００４，２７９（５）：３３２７－３３３９．　【２］Ｐｅｌｅｎｇａｒｉｓ　Ｓ，Ｋｈａｎ　Ｍ．Ｔｈｅ　ｍａｎｙ　ｆａｃｅｓ　ｏｆ　ｃ—ｍｙｃ．ＡｒｃｈＢｉｏｃｈｅｍ　ｎ　ＭＦ．Ｊａｍｅ　ＭＳ．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｇｍｗｔｌｌ　Ｆａｃｔｏｒｓ　ａｎｄ　Ｐｉｎｔｏ—ｏｎｅｏｇｅｎｅ　［５】　ＳｕｓａＢｉｏｐｈｙ，２００３，４１６（２）：１２９－１３６．　［３　Ｄｅ　Ｎｉ３］　ｓ　Ｆ，Ｓｉｃａ　Ｖ，Ｈｅｒｍａｎｎ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．ｃ－ｍｙｃ　ｏｎｅｏｐｒｏｔｅｉｎ：ｃｅｌｌ　ｃｉｒｃｌｅ—ｒｅｌａｔｅｄ　ｅｖｅｎｔｓ　ａｎｄ　ｎｅｗ　ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓｉｎ　ｃａｎｃｅｒ　ａｎｄ　ｍＲＮＡ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｇｒｏｗｉｎｇ　Ｔｉｐ　ｏｆ　Ｒｅｄ　Ｄｅｅｒ（Ｃｅｒｏｕｓ　ｅｌａｐｈｕｓ）Ａｎｔｌｅｒ　Ｕｓｉｎｇ　Ｒｅｖｅｒｓｅ—ｔｒａｎｓｅｆｉｐｔａｓｅ　Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　Ｃｈａｉｎ　Ｒｅａｃｔｉｏｎ（ＲＴ—ＰＣＲ）　ｆＪ１．ＪＥｘｐＺｏｏｌ，１９９８，（２８１）：３６—４２．　［６］　韩春梅　高庆华，唐继伟等．塔里木马鹿再生茸组织中原癌基因　ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ　ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｃｅｌｌ　Ｃｙｃｌｅ，２００３，２（４）：３２５－３２８．　［４】Ｄｕｈｏｉｓ　ＮＣ，Ａｄｏｌｐｈｅ　Ｃ，Ｅｈｎｉｎｇｅｒ　Ａ，ｅｔ　ａｉ．Ｐｌｃｅｎｔａｌｒｅｓｅｕｅ　ｒｅｖｅａｌａｓ　ａ　ｓｏｌｅ　ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ　ｆ０ｒ　ｃ—ｍｙｃ　ｉｎ　ｅｍｂｒｙｏｎｉｅｅｒｙｔｈｒｏｂｌａｓｔ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ａｎｄ　ｃ—ｍｙｃ、ｃ—ｆ０ｓ的表达Ⅱ１．中国农学通报，２０１１，２７（２９）：９－１２．　・５３・