槐花米中芦丁提取过程的展开剂优化处理

北方药学２０１６年第１３卷第１２期　１２３　槐花米中芦丁提取过程的展开剂优化处理　周陆怡　潘文嘉（广东医学院药学院东莞５２３８０８）　摘要：目的：研究槐花米中芦丁的提取过程、展开剂的优化处理。方法：根据芦丁的酸碱性和结构特征选用混合溶剂作为展开剂，　乙醇与芦丁具有相同的官能团，加入冰乙酸可减少拖尾。结果：分离良好，斑点圆且较集中，无拖尾现象。结论：展开剂的选择除了　有良好的结果，应尽量选择低毒或者无毒的试剂，优化展开剂调整为乙醇：水：冰乙酸：８：２：０．５　关键词：槐花米芦丁展开剂　，中图分类号：Ｒ２８５．５　文献标识码：Ｂ　文章编号：１６７２—８３５１（２０１６）１２—０１２３—０１　Ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｄｉｓｐｏｓａｌ　ｏｆ　ｅｘｐａｎｄｉｎｇ　ａｇｅｎｔ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　Ｒｕｔｉｎ　ｉｎ　Ｓｏｐｈｒａｊａｐｏｎｉｃａ　Ｚｈｏｕ　Ｌｕｙｉ　Ｐａｎ　ｗｅｎｊｉａ（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　Ｄｏｎｇｇｕａｎ　５２３８０８，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎｔｅｎｔｉｏｎ：Ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｄｉｓｐｏｓａｌ　ｏｆ　ｅｘｐａｎｄｉｎｇ　ａｇｅｎｔ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　Ｒｕｔｉｎ　ｉｎ　Ｓｏｐｈｒ￣ａｐｏｎｉｃａＭｅｔｈｏｄ：ａｃｃｏｒｄｉｎｇ　ｔｏ　．ａｃｉｄ，ａｌｋａｌｉ　ａｎｄ　ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ　ｆｅａｔｕｒｅｓ　ｏｆ　Ｒｕｔｉｎ，ｗｅ　ｃｈｏｏｓｅ　ｍｉｘｅｄ　ｓｏｌｖｅｎｔ　ａｓ　ｅｘｐａｎｄｉｎｇ　ａｇｅｎｔｍｅａｎｗｈｉｌｅ　ｅｔｈａｎｏｌ　ａｎｄ　Ｒｕｔｉｎ　ｈａｖｅ　ｔｈｅ　ｓａｍｅ　．ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｇｒｏｕｐ，ｗｈｉｃｈ　ｃａｎ　ｒｅｄｕｃｅ　ｔａｉｌｉｎｇ　ｗｈｅｎ　ａｄｄｅｄ　ｔｏ　ａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄＲｅｓｕｌｔ：ｔｈｅ　ｓｅｇｒｅｇａｔｉｏｎ　ｉｓ　ｇｏｏｄ，ｔｈｅ　ｓｐｅｃｋｌｅ　ｉｓ　ｃｉｒｃｕｌａｒ　ａｎｄ　ｒｅｌａｔｉｖｅｌｖ　．ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ，ｔｈｅｒｅ　ｉｓ　ｎｏ　ｐｈｅｎｏｍｅｎｏｎ　ｏｆ　ｔａｉｌｉｎｇ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ｂｅｓｉｄｅｓ　ｔｈｅ　ｆａｖｏｒａｂｌｅ　ｒｅｓｕｌｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｈｏｏｓｉｎｇ　ｅｘｐａｎｄｉｎｇ　ａｇｅｎｔｓｅｌｅｃｔ　ｌｏｗ　ｔｏｘｉｃｉｔｙ　，ｏｒ　ｎｏｎ—ｔｏｘｉｃ　ｒｅａｇｅｎｔ　ａｓ　ｐｏｓｓｉｂｌｅ　ａｓ　ｗｅ　ｃａｎ　ａｎｄ　ａｄｊｕｓｔ　ｅｘｐａｎｄｉｎｇ　ａｇｅｎｔ　ｆｏｒ　ｅｔｈａｎｏｌ：ｗａｔｅｒ：ｇｌａｃｉａｌ　ａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ＝８：２：０．５．　Ｋｅｙ　Ｗｏｒｄｓ：Ｓｏｐｈｒａｊａｐｏｎｉｃａ　Ｒｕｔｉｎ　Ｅｘｐａｎｄｉｎｇ　ａｇｅｎｔ　槐花为豆科植物槐（Ｓｏｐｈｏｒａ　ｉａｐｏｎｉｃａ　Ｌ．）的干燥花及花蕾，　３结果　我国大部分地区生长。四川有着种植槐树的悠久历史。槐花中　优化展开剂调　含有丰富的芸香甙（芦丁）、三萜皂苷、槐花米甲素、乙素、丙素等　整为乙醇：水：冰乙　多种物质１］Ｉ。医学证明槐花具有清肝泻火、清热凉血、增强心脏　酸＝８：２：０．５，结果表　收缩、减少心脏搏动次数的功能，是高原缺氧人群的最佳医疗保　明，分离良好，斑点　健品１２ｌ。其中芦丁是有效成分，本文主要讨论从槐米提取芦丁的　圆较集中，无拖尾现　过程中鉴定实验展开剂的优化处理。　１材料与仪器　象。ＴＬＣ结果见图１。　４讨论　１在以往的检测芦　１．１材料：槐花购于东莞国药；芦丁、槲皮素标准品购于中国食品　４．药品检定所；甲醇；丙酮；苯；氯化铝；乙醇（均为ＡＲ级）；聚酰胺　丁和榭皮素实验中　薄膜（浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂）；聚酰胺６０～８０目　用到的展开剂为甲　图１聚酰胺色谱柱层　析后的收集液的聚酰　胺薄膜层析分析图　说明：图１中的１表　示收集液１：２表示收　集液２；３表示收集液　３：４表示芦丁标准　品：５表示槲皮素标　准品。　（浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂）。　醇：丙酮：苯＝８：１：１。　１．２仪器：ＺＦ一１型紫外分析仪（上海顾村电光仪器厂）　２方法　甲醇，丙酮和苯均为挥发性有机气体，特别是苯有剧毒，长期吸　人会侵害人的神经系统，急性中毒会产生神经痉挛甚至昏迷、死　２．１原理：采用“相似相溶”原则选择展开剂，使待测组分的Ｒｆ值　亡。考虑到实验安全性和健康性，优化了展开剂，尽量选择低毒　性甚至无毒的试剂。乙醇和冰乙酸均为低毒试剂，大大保证了　在０．２～０．８之间，最终能使各组分之间有效分离。　２．２过程：从槐花米提取芦丁的过程中，一个步骤是用柱层析分　实验人员的安全性和健康性。　２检测对象芦丁具有弱酸性，在展开剂中加入一定比例的酸　离芦丁和槲皮素，然后用聚酰胺ＴＬＣ鉴定芦丁和槲皮素。步骤：　４．聚酰胺５ｇ，加水３０ｍＬ，搅匀，倒入层析柱（打开层析柱活塞，让　性物质＿３Ｌ一冰乙酸，可以减少拖尾现象，使ｔｌｃ实验结果更优良　在选择溶剂时，选择了与分离　水滴出，让聚酰胺自由沉降而填实。注意保持液面ｌｃｍ高度）。　４３芦丁分子中具有较多酚羟基，芦丁与乙醇相似性结构增强，芦　将样品轻轻置于柱上端，加好样品后，先用５０％的乙醇冲洗，待　物质芦丁有相同官能团的乙醇，两层析带之间的距离约ｌｃｍ后，再用９０％的乙醇冲洗。用试管　丁在展开剂中溶解度增大，也大大降低了拖尾现象。　收集洗脱样品，每试管接收３０ｍＬ，分离结果用ＴＬＣ检测。配制　参考文献　展开剂，乙醇：水：冰乙酸＝８：２：０．５。将展开剂倒入展开缸，展开缸　『１１陈运中．苦荞麦黄酮含量的测定ｌ　Ｊ１．食品科学，１９９８，３：５４．　中展开剂的高度４ｍｍ左右。聚酰胺薄膜画基线，基线距底边　【２］雷泞菲，桑世华，彭书明，等．槐花中芦丁的提取工艺研究『ＪＪ．时　２００８，１９（４）：８６０—８６１．　１．０～１．５ｃｍ；点样（点样顺序：收集样品１、收集样品２、收集样品　珍国医国药，３１何志昂，王权．浅谈ＴＬＣ中展开剂的选择【ＪＪ．中国高新技术企　３、芦丁标准品、槲皮素标准品），点样直径不大于２ｒａｍ。喷１％的　『Ａ１Ｃ１　显色。　业．２００９，７：４４—４５．　清中相关抗氧化酶活性及ＭＤＡ、活性氧含量的影响ｌＪＩ．食品科　安全科学合理用药提供了参考。　参考文献　学，２００４，２５（２１）：１６２—１６５．　［１］布和巴特尔，奥・乌力吉．传统蒙药与方剂【Ｍ】．内蒙古科学技术　『５１任双杰．大黄玉山降脂合剂辨证治疗２型糖尿病合并血脂异　常的临床研究『Ｄ１．石家庄：河北医科大学，２０１４．　［２］罗建英，吴基良，陈金和．大鼠子宫内膜异位症模型的建立和　［６］朱润芝，李京敬，谢超，等．过氧化作用与肝脏疾病ＩＪＪ．世界华人　出版社，２０１３：３０３．　评价ＩＪ】．成宁学院学报，２００３，１７（１）：３３—３５．　消化杂志，２０１０，ｌ８（１１）：１１３４一ｌ１４０．　△基金项目：内蒙古自治区２０１５年度研究生科研创新立项资助项　ｆ３１马慧聪，连方．氧化应激与子宫内膜异位症的中西医研究进展　目（￥２０１５１０１３６０４）：国家自然科学基金项目（８３１６０６７４　ｏ　【ＪＩ．辽宁中医杂志，２０１５，４２（６）：１２７３—１２７４．　通讯作者　［４］陈永芬，申琳，鱼泳泳，等．低聚原花青素方剂对小鼠肝脏、血