斑马鱼LD50鱼类（斑马鱼）急性毒性（重铬酸钾）实验报告

鱼类(斑马鱼)急性毒性(重铬酸钾)实验报告⼀、实验⽬的与实验要求

1、通过本实验，熟悉和掌握急性毒性试验的设计、条件、操作步骤，以及试验结果的计算、分析和报告等全过程。

2、掌握常⽤的动物染毒途径和⽅法。掌握急性毒性实验设计，操作⽅法，结果判定。

3、了解⼀次或24⼩时内多次给予受试化学物后，动物所产⽣的急性毒性反应及其严重程度，中毒死亡的特征以及可能的死亡原因，观察受试物毒性反应与剂量的关系，求出半数致死量。能较熟练地计算出LC50及毒性判定。4、对⽐观察毒物对斑马鱼的作⽤。

5、体验开放式实验教学，培养⽣物实验意识，提⾼学习的主动性、获取实验知识的能⼒和撰写实验报告⽔平。⼆、实验⽅案1、实验仪器

天平、⼿套、50mL烧杯、量筒、培养⽫、鱼缸、曝⽓装置2、实验药品

斑马鱼100条、重铬酸钾、鱼⾷3、实验原理(1)⽅法的设置

鱼类毒性实验⽅法可以分为静态法和动态法两⼤类。本实验采⽤静态法，以96⼩时为⼀试验周期，在24、48、72、96⼩时记录斑马

鱼的死亡率，确定斑马鱼死亡50%时的受试物浓度。半数致死浓度⽤24h LC50、48h LC50、72h LC50和96h LC50表⽰，并记录⽆死亡的最⼤浓度和导致鱼类全部死亡的最⼩实验浓度。(2)受试药物

受试毒物要为常见毒物，并在⽔体中会存在，对鱼类养殖的影响较为严重。另外受试毒物在⽔中应要稳定，不易分解，易溶解等。(3)受试鱼类

实验鱼类⼀般选择对污染物敏感，在⽣态类群中具有代表性，经济价值⽐较⾼，来源丰富、取材⽅便、遗传稳定，⽣物学背景资料

丰富，⼤⼩适中，在室内条件下易于饲养和繁殖的种类。

斑马鱼是国际上通⽤的鱼类急性毒性实验鱼种。建议的实验温度21-25℃，建议实验鱼的全长2.0?1cm。(4)研究意义

鱼类是⽔⽣⾷物链的顶级⽣物，也是⽔体中最为重要的经济动物。

在污染⽔体中，当污染物达到⼀定浓度时，就会引起鱼类各种中毒反应，例如⾏为失常，组织器官病变，⽣理功能紊乱乃⾄死亡。在⼈为控制条件下，进⾏各种鱼类毒性实验，不仅⽤于化学品毒性强度测定、⽔体污染程度、废⽔及其处理效果检查，⽽且也为制定⽔质标准、评价环境质量和管理废⽔排放提供科学依据。因此，开展鱼类急性毒性实验的研究，对实验结果给出正确合理的评价，对于我国⽔资源保护具有重要意义。4、实验步骤(1)预实验

正式实验前必须对实验⽤鱼进⾏驯养，然后根据预实验得出的结果(以上部分内容可另⾏安排实验时间)，在包括使鱼全部死亡的最低

浓度和96h鱼类全部存活的最⾼浓度之间⾄少应设置5个浓度组。每个实验浓度组应⾄少设3个平⾏系列，每⼀系列设⼀个空⽩对照。(2)正式试验

浓度系列：每组分别取0，50，100，150mg/L重铬酸钾加⼊鱼缸⽔中，充分混匀。

在实验开始后3h或6h观察各处理组鱼的状况，并记录实验鱼的异常⾏为〈如鱼体侧翻、失去平衡，游泳能⼒和呼吸功能减弱，⾊素沉积等〉。

⾄少在24h、48h、72h和96h后检查受试鱼的状况，并做记录。如果受试鱼没有任何⾁眼可见的运动，如鳃的扇动、碰触尾柄后⽆反应，即可判断该鱼已死亡。观察并记录死鱼数⽬后，将死鱼从容器中取出。

三、实验结果与数据处理1、斑马鱼数据记录情况表1斑马鱼时间-存活条数

10 4 4 3 3 3 340 4 4 4 4 4 470 4 4 4 4 4 4100 4 4 3 3 3 3150 4 4 4 4 4 2

2、数据处理结果（直线内插法）表2 斑马鱼死亡率-浓度关系

0 0 0 0 0 0 010 0 0 25 25 25 25

40 0 0 0 0 0 070 0 0 0 0 0 0100 0 0 25 25 25 25150 0 0 0 0 0 50

图1 24LC50图2 48LC50任取72⼩时数据分析误差25-0/25=100%，任选100mg/L浓度分析误差24-48⼩时25-0=25，其他⼩时25-25=0四、实验结论1、数据评价

a.由表格记录数据仅126⼩时150mg/L浓度死亡率为50%其他数据作图不能够得出LC50。

b.由误差分析可以得到数据误差率为100%，因⽽可以认为鱼类死亡为偶然因数或者因饥饿死亡，数据不具参考价值。

c.由预实验和相关⽂献分析得到斑马鱼的24⼩时半致死浓度为350mg/L，⼤于所设的150mg/L的范围。

d.有上述实验结果对照《化学物质对鱼类急性毒性危害分级标准》150mg/L对斑马鱼为低毒。2、原因分析

a.所设浓度不在范围之内，故现象不明显。

b.实验之前鱼类没有养殖好，存在饥饿等不适应因素。c.药品被⽔⾥有机物影响。五、实验⼼得体会

1．实验⽤⽔使⽤⾼质量的⾃然⽔或标准稀释⽔(见本节附录)，也可以使⽤饮⽤⽔(必要时应除氯)。

2．溶解氧不低于空⽓饱和值的60%。曝⽓时不能使受试物明显受损。3．预实验不够准确，故没有很好的得到实验数据，因⽽需要预习充分。