大学课程《细胞生物学》实验教案-几种不同类型显微镜的使用及其对胞质环流的观察

大学课程《细胞生物学》实验教案

几种不同类型显微镜的使用及其对胞质环流的观察

一、实验目的

学会使用相差显微镜，掌握暗视野技术，以及荧光显微镜等技术

二、实验原理

在活细胞中，原生质流动是细胞活力强弱的重要标志，它的产生与

细胞中微丝的作用是密不可分的。微丝的纤维较细，直径为5－6nm，

主要成分是肌动蛋白、肌球蛋白和原肌球蛋白，并像肌肉一样有收缩

功能。微管是由一种叫做微管蛋白的蛋白质组成的，位于原生质（静止

的）外质，紧靠在质膜之下，离运动的内质至少有1µm的距离，与胞质

川流运动无关，主要起保持细胞形状、承担细胞运动和细胞内物质运输

的作用。

另外，用秋水仙素与细胞松弛素B处理也可产生不同的结果。经

秋水仙素处理后，细胞的纤维被扰乱，但不影响川流运动，这是与秋水

仙素影响边缘微管作用有关。相反，用细胞松弛素B处理，就可抑制细

胞的川流运动，很明显，微丝担负着川流运动的功能。胞质环流需要消

耗能量，也受温度、渗透压以及离子浓度的影响。

三、实验材料

新鲜洋葱鳞茎，刚毛藻等。

四、实验器材

相差显微镜，普通光学显微镜，黑卡纸，载玻璃片，盖玻片，镊子，吸水

纸，剪刀，滴管，擦镜纸。

五、实验药品

100µg/ml秋水仙素溶液，20µg/ml细胞松弛素B(cytochalasin B)，蒸馏水，香玻油，二甲苯。

六、实验步骤

1. 取新鲜洋葱鳞茎内表皮约1cm2 或更小，放在干净的载玻片上，

加一小滴水，将盖玻片倾斜盖上，并注意不出现气泡，即制成水封片。

2. 取一块黑纸，把它剪成暗视野显微镜用的遮光板，并放入普通

光学显微镜的聚光器下的光阑上，制成暗视野显微镜。（须反复调整遮

光板的尺寸以得到最佳效果）。

3. 把制成的水封片放在暗视野显微镜下用10倍物镜观察，可以

看到在明亮的细胞壁与半透明的细胞核之间有很多极小而明亮的“质

点”或颗粒，仔细观察，可以看出这些正作有向的运动（速度很慢），

水封片中多加些水会促进这种运动。

4. 学习相差显微镜，荧光显微镜和倒置显微镜的使用方法和有

关操作技术。