实验十一 植物种子生活力快速测定
一、实验目的
掌握植物种子生活力检测的基本原理及快速鉴定植物种子生活力的方法。
二、实验原理
种子活力是决定种子在发芽和出苗期间的活性强度和种子特性的综合表现(指田间条件下的出苗能力及与此有关的其他特征和指标),种子生活力是指种子的发芽潜在能力和种胚所具有的生命力(通常指一批种子中具有生命力种子数占种子总数的百分率)。种子贮藏过程中必须维持种子是有活力的,因此定期进行生活力和活力的检测是非常重要的。测定种子生活力方法常用发芽率测定法,该法是指在最适宜的条件下,在规定天数内发芽的种子占供试种子的百分数。它是决定种子品质和实用价值大小的主要依据,与播种时的用种量直接有关。但是常规方法(直接发芽)测定种子发芽率所需的时间较长,对于处于深休眠状态的种子,几乎难于应用。特别是有时为了应急需要,没有足够的时间来测定种子发芽率,所以有必要根据种子的生理特性建立起一套快速测定种子生活力的方法。
红墨水染色法
凡是生活的活细胞的原生质膜都具有选择吸收能力,它对某些染料不让透过,因此用这类染料(如红墨水、酸性靛蓝等)不能使种胚染色。而死种子的胚细胞原生质膜丧失了选择吸收能力,于是染料进入死细胞,将胚完全染色。因此,可根据种胚或子叶对染料的着色情况判断种子的发芽率。
三、实验材料
小麦种子、大麦种子、籼稻种子、玉米种子、粳稻种子、蚕豆种子、大豆种子。
四、设备与试剂
恒温箱,培养皿,烧杯,镊子,刀片,紫外荧光灯,滤纸(无荧光),琼脂,沸水。
5% 红墨水:市售红墨水5 mL加95 mL自来水。
五、实验步骤
1.红墨水染色法
将待测种子在30~35℃温水中浸种(小麦、大麦、籼稻种子6~8h;玉米种子5 h 左右;粳稻种子2 h),以增加种胚的呼吸速率,使显色迅速;取吸胀的种子200 粒,沿种子胚的中心线纵切为二半,将其中的一半置于红墨水培养皿中5~10 min;用红墨水染色后,倒去废液,用水冲洗多次,至冲洗液无色为止,并检查种子死活。凡种胚不着色或着色很浅的为活种子,种胚与胚乳着色程度相同的为死种子。也可用沸水杀死的种子作为对照观察。
六、注意事项
红墨水染色时间不能太长,因细胞膜的选择透性具有相对性,染好色后,一定要反复冲洗干净。
七、问题讨论
1. 红墨水或酸性靛蓝将活种子或死种子内淀粉部分均能染上色,为什么?
2. 实验测得的发芽率与实际发芽率是否一致?为什么?
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