CML端粒酶活性检测的临床意义

…．　．堂　垒皇箜　＝＝：　璺　：：篓　：望　塑　：：＝：：；曼：！；　妻焦　糖化血红蛋白和果糖胺之间的影响关系　魏【中图分类－￣－］Ｒ４４６．１　梅刁方丽　热斯汉　【文章编号】１００６—１９５９（２０１０）０２—０２１２—０１　液标本。④静脉抗凝标本如果出现凝结，请重新采集血液标本。　１．２．２标本测定：①果糖胺测定试剂盒。（四氮唑还原　法）。②糖血红蛋白采用Ⅱ型糖化ｍ红蛋白快速定量检测　试剂。　２结果　【文献标识码】Ｂ　糖尿病是在多基因遗传基础上，引起胰岛素的分泌障碍和　胰岛素生物学效应不足，血糖正常但易得糖尿病者，有家族史、　肥胖、血糖增高、导致以高血糖症为基本生化特点的糖、脂肪、　蛋白质、水、电解质以及有代谢紊乱的临床综合征，但处在早期　糖尿病人需做空腹血糖、餐后血糖、两小时血糖增高和做糖耐　量试验服糖后两小时血糖增高，没有摄入任何热量至少８ｈ，空　腹血糖≥７．Ｏｍｍｏ［／Ｌ，作为诊断糖尿病新标准，同时有“三多一　少”的症状及尿糖阳性。口服相当于７５ｇ无水葡萄的水溶液，２ｈ　血糖≥１１．１ｍｍｏｌ／Ｌ。血糖控制的指标反映了前一时间内血糖　的平均水平，我们常用的指标有下列两种：糖化血糖蛋白　（ＨｂＡｌｃ）、果糖胺（ＦＲＵＣ）对于评价血糖控制状况是一个极有用　的试验，它反映前２～３周期血中平均葡萄糖水平及每３个月左　右的血糖平均水平和糖代谢情况，同时与糖尿病并发症是微血　管病变的关系密切，在糖尿病诊治上极有临床参考价值。　１材料与方法　果糖胺（糖化血清蛋白）是定量测定人血清中果糖胺的含　量。是在该蛋白质生命期中缓慢而持续形成，而血清蛋白占主　要成分的白蛋白半衰期为１９ｄ，因此果糖胺测定提供一个短期２　３周的平均血糖水平信息。而在多数血糖高于正常的糖尿病　患者糖化血红蛋白增高，对空腹血糖正常而糖耐量下降的病人　糖化血红蛋白也可增高。其主要原因是糖化血红蛋白可反映　过去３个月平均血糖浓度，其升高与一些临床事件的发生和预　～后相关。　３讨论　糖尿病的监测最重要是定期性的进行血糖、血压、血脂、血　１．１材料：挪威Ｎｙｃｏｃａｒｄ　ＲｅａｄｅｒⅡ多功能全定量金标检　测仪、ＢＳ一３００自动化生化分析仪、真空采血管及ＥＤＴＡ抗　凝管。　１．２方法　１．２．１标本的采集及注意事项：①糖化血清蛋白需空腹静　脉血２ｍｌ，３０００ｒ／ｍｉｎ离心而糖化血红蛋白不需要限制空腹、餐　后及随机都可以。也不需要离心，只轻轻摇匀，采集静脉血分　别置人不同的采血管中。②最好是一次性采集，避免对采血部　位过度挤压。③静脉全血经ＥＤＴＡ或肝素抗凝，保存不超过　４ｈ，不要使用溶血的静脉抗凝的全血标本，如有溶血应重新血　液粘稠度、体重等方面的检查，而且还进行良好的自我调理，糖　尿病是一个慢性的全身性的疾病，一旦得上很难根治，所以糖　尿病诊断治疗是一个长期的过程。糖尿病时糖化血清蛋白增　加比糖化血红蛋自迅速，当血糖得到良好的控制时，糖化血清　蛋白下降比糖化血红蛋白迅速，及时提醒医生病人血糖控制的　监测情况。糖化血清蛋白的改变能较早的为临床医师提供血　糖控制的情况。　作者单位：８３４６００新疆额敏县人民医院检验科　ＣＭＬ端粒酶活性检测的Ｉｌ缶床意义　刘　薇毛齐学　刘淑香谢娟　王晓静李春雷　【摘要】端粒酶活性与慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）的发生发展密切相关。端粒酶活性检测可以作为慢性粒细胞白血病诊断、病程　监测及预后判断的一个有用的生物学指标。　【关键词】白血病；端粒酶活性检测　【中图分类号】Ｒ４４６．１１　【文献标识码】Ｂ　【文章编号】１００６—１９５９（２０１０）０２—０２１２—０２　环，７２％保温３ｒａｉｎ。ＰＣＲ扩增产物经１２０ｇ／Ｌ聚丙烯酰胺凝胶　电泳后，将凝胶置固定液（体积分数０．１０的无水乙醇、体积分　数０．００５的乙酸新鲜配制）中固定，经ＡｇＮＯ　染色１０ｍｉｎ，置显　色液（３Ｏｇ／Ｌ的ＮａＯＨ、４ｇ／Ｌ的甲醛新鲜配制）中显色保存。端　粒酶阳性结果在凝胶上可见每隔６个核苷酸的梯形条带。用凝　胶成像分析软件处理，得出各标本的相对吸光度（Ａ）值代表端　粒酶活性。并根据Ａ值大小将端粒酶活性分为阴性、弱阳性、　阳性、强阳性４个等级。同时据Ａ值大小将慢性期ＣＭＬ分为高　活性组（≥２．０）和低活性组（＜２．０）。取骨髓经２４ｈ培养制备　染色体并采用Ｒ显带技术进行核型分析。　１．３统计学处理：数据以（ｉ　－ｓ）表示，４采用ｔ检验及方差　分析。　２检测结果　２．１　正常对照组端粒酶活性经凝胶成像分析系统分析。１５　例正常对照者骨髓端粒酶活性为０．７４±０．５７，无１例阳性或强　阳性，均呈阴性或较低水平表达。良性血液病组骨髓细胞良性　增殖，端粒酶活性为０．７３　４－０．４２，无端粒酶阳性或强阳性者。　良性血液病组端粒酶活性与正常对照组比较不增高（Ｆ＝３６．　３８，ｑ＝０．１８—０．３６，Ｐ＞０．０５）。ＭＡ、ＩＴＰ、ＩＤＡ端粒酶活性分别　为０．８５±０．５４、０．８１±０．６１、０．６４±０．５３，良性血液病之间端粒　酶活性差异无显著性（ｑ＝０．０９—０．４４，Ｐ＞０．０５）。　２．２　ＣＭＬ病人端粒酶活性：ＣＭＬ慢性期及急性转化期端　粒酶活性分别为２．２３±１．４８、５．７２±１．４４，与正常对照组比较　均升高（Ｆ＝３６．３８，ｑ＝５．８４、１６．３３，Ｐ＜０．０１），与良性血液病对　为了解慢性粒细胞白血病（ｃＭＬ）不同阶段端粒酶的活化　情况及其临床意义，我们采用改良的ＴＲＡＰ一银染法检测了３０　例ＣＭＬ病人骨髓单个核细胞（ＭＮＣ）端粒酶活性水平，以探讨　端粒酶活性检测对ｃＭＬ的临床意。　１资料与方法　１．１对象及分组：３Ｏ例ＣＭＬ病人中，初诊的慢性期病人　２０例，男ｌＯ例，女１Ｏ例，年龄２３—６４岁，平均（４３．６　４－１２．１）　岁；急性转化期（加速期或急变期）病人１Ｏ例，男７例，女３例，　年龄１５—６３岁，平均（３５．２±１６．２）岁。所有ＣＭＬ病人均经染　色体分析证实为Ｐｈ阳性ＣＭＬ。另取２５例良性血液病病人及　１５例正常人为对照。良性血液病包括缺铁性贫血（ＩＤＡ）１４例，　巨幼细胞贫血（ＭＡ）６例，特发性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）５例。　对照组年龄为１８—６Ｏ岁，平均（３Ｏ．２±１３．１）岁。所有病人诊断　均符合文献标准，正常对照均经骨髓细胞形态学检查排除血　液病。　１．２实验方法：分离计数ＭＮＣ取骨髓液标本常规分离　ＭＮＣ。端粒酶提取的方法是取细胞悬液加适量裂解缓冲液［含　有１０ｍｍｏｌｆＬＴｆｉｓ—ＨＣｉ（ｐＨ７．５），１　ｍｍｏｌ／ＬＭｇＣ１，．１　ｍｍ０Ｌ／ＬＥＧＴＡ．　０．１ｍｍｏｌ／ＬＰＭＳＦ，５ｍｍ０Ｌ／　一巯基乙醇、体积分数０．００５的　ＣＨＡＰＳ及体积分数０．１０的甘油］调整细胞数为１０７／Ｌ，置一　２Ｏ℃保存。ＴＲＡＰ反应方法略加改进，５０ｔ￣Ｌ反应体系［２０ｒｅｏｔｏｌ／　ｎｒｉｓ—ＨＣ１（ｐＨ８．３），１．０ｍｍｏｌ／ＬＭｇＣ１，，６３ｍｍｏｌ／ＬＫＣ１．０．０５ｇ／ＬＴ．　ｗｅｅｎ２０，ｌｍｍｏ］／ＬＥＧＴＡ，５０１￣ｍｏｌ／ＬｄＮＴＰｓ０．１ｔｘｇＴＳ引物，０．１　Ｌ　牛血清清蛋白，２　端粒酶提取液，０．１　ｇＣＸ引物，２ＵＴａｑＤＮＡ　聚合酶］３Ｏ℃孵育３０ｒａｉｎ后，９４ｏＣ３０ｓ，５５ｏＣ３０ｓ，７２ｏＣ３０ｓ，３０个循　，一２１２一　医学信息　２０１０年２，９　第２３卷　第２期　医学影像与检验　临床实验室医源性感染危险因素的分析　詹大庆魏玉红　【摘要】目的：探讨临床实验室医源性感染危险因素与预防措施。方法：分析临床实验室可能存在的医源性感染危险因素。提出　改进预防措施。结果：采取相应的措施，最大限度控制临床实验室医源性感染。结论：健全各种故规章制度，加强学习和管理，严格　操作规程，有效预防控制实验室内医源性感染的发生。　【关键词】¨盘床实验室；医源性感染；危险因素；预防措施　【中图分类号】Ｒ４４６　【文献标识码】Ａ　【文章编号】１００６—１９５９（２０１０）０２—０２１３—０１　医学临床实验室是一个特殊的实验室，实验室的工作人员　员对医源性感染的认识，积极做好医院感染管理的预防控制　不仅要与患者直接接触，而且还要与患者的血液、体液、分泌　工作。　物、排泄物等接触，所以临床实验室极易受到医源性感染。为　２．２建立健全严格的实验室管理制度：实验室必须建立　有效地预防实验室医源性感染的发生，我科对医院感染危险因　严格的规章制度，制定各种存操作规程。严格按照操作规程进　素采取了相应措施，收到了较好的效果。　行操作，工作中穿工作服，戴一次性手套，必要时要穿隔离衣、　１　危险因素　戴口罩、乳胶手套、防护性眼镜，禁止在实验室内饮水、进食、吸　１．１　自我保护意识淡漠：有的工作人员只重视实验室的　烟，禁止在实验室冰箱内存放食品ｕ　Ｊ。　检验质量，而忽视自我保护，操作中不戴防护手套、口罩、帽子　２．３重视实验器材用品的消毒：各种器具除已知无传染　和防护眼镜，在实验中途用污染的手接听电话，在实验室内饮　性的器材外，凡直接或间接接触检验标本的器材均视为有传染　水、进食、吸烟，穿工作服在值班室休息等。　性，应进行消毒处理　ｊ。有关仪器、冰箱等定期清洗，用高效环　１．２对标本具有传染性缺乏认识和防护：临床实验室汇　保消毒剂消毒。　集各类患者血液、体液、分泌物、排泄物等各种标本，这些标本　２．４做好实验室环境内的消毒：做到每天对空气、地面、各　带有不同种类的病原微生物，长期接触带有传染性的标本，可　种物体表面进行常规消毒。在进行实验时，应避免污染，如遇　能存在着被感染的危险，并且存在着实验室环境被污染的　有污染且具有传染性，应立即用消毒液消毒，防止扩散，有效防　危险。　止医源性传播。　１．３工作环境差：由于检验科房屋比较紧张，设计布局不　合理，没有区分清洁区、半污染区、污染区，通风设备不足。工　２．５检验报告单的消毒：检验报告单必须放进熏箱消毒　候再发放，避免交叉感染。　作人员每天接触许多患有传染病患者的标本，标本离心时会产　２．６加强对实验室垃圾的管理：必须严格按照《医疗废物　生气溶胶，标本如有外溢会造成空气、台面和地面污染，增加了　管理条例》、《医疗卫生机构医疗废物管理管理办法》的规定对　源性感染危险因素。　１．４实验室仪器污染：实验室用的仪器有的直接与标本　废弃物进行处理，使其无害化，做到生活垃圾与医疗垃圾分开存　放，固体废物做到先消毒然后集中焚毁，液体废物应消毒后再　接触，如血细胞分析仪、生化分析仪等，在仪器吸取标本时，容　做作废弃处理。　易造成仪器表面污染；离心机在离心时若试管破裂，液体外溢　２．７建立健全实验室工作人员档案：要求工作人员每年体　也易造成污染；其他如冰箱、培养箱、显微镜等都可能被污染，　若不及时消毒处理，也会引起工作人员感染。　检一次，及时接种疫苗。　综上所述，通过采取这些预防措施，提高了检验人员的自　１．５检验报告单的污染：检验报告单被临床标本污染或　我防范意识和预防医院感染的认识，加强了检验科医院感染方　被实验室工作人员的手污染后，未经消毒交给临床医生或患　者，也增加了交叉感染的机会。　面的管理，使检验科医源性感染的危险因素得到控制，避免污　染源流向社会，有效地保护了工作人员、患者和社会环境。　１．６试验室垃圾是重要传染源：实验后的垃圾如各种标　本、培养基、细菌鉴定条、药敏条、自动分析仪的废液等，这些都　参考文献　是传染源，若处理不好，不仅引起医院内交叉感染，流向社会后　［１］　中华人民共和国卫生部医院感染管理规范（试行）［Ｓ］北　果难以想象。　京：中华人民共和国卫生部，２０００　２预防措施　［２］　宁尚民．检验科预防医院感染的消毒方法［Ｊ］．中华医院　２．１　加强学习，提高试验室工作人员对医院感染的认识：　感染学杂志，２００４，１４（２）：２０３　组织试验室工作人员学习《传染病防治法》、《医院感染管理办　法》、《病原微生物安全管理条例》、《突发公共卫生事件应急条　作者单位：７５５０００宁夏中卫市人民医院检验科　例》、《试验室生物安全规范》等相关法律法规知识，提高检验人　照组比较亦升高（ｑ＝３．８０～１６．４２，Ｐ＜０．０５），且急性转化期端　血液病之间端粒酶活性无显著差异，说明端粒酶活性检测不能　粒酶活性高于慢性期（ｑ＝１２．０６，Ｐ＜０．０１）。ｃＭＬ急性转化期　用于良性血液病之间的鉴别。ｃＭＬ是临床上一种发展较为缓　端粒酶活性显著增高，平均端粒酶活性为５．７２，约为正常对照　慢的骨髓增生性疾病。目前临床上尚无能预测ＣＭＬ病程进展　的６—７倍，阳性比例为８０％（８／１０），其中５例为强阳性。ｃＭＬ　的实验室指标。本研究的实验结果证实，在ＣＭＬ转化期端粒酶　慢性期端粒酶活性中等增高，平均端粒酶活性为２．２３，约为正　阳性率高（８０％），而在疾病的慢性阶段端粒酶阳性率低　常对照的２—３倍，阳性比例为３５％（７／２０），其中ｌ例呈强阳　（３５％），约２／３的病人端粒酶活性阴性或低水平表达，转化期　性。呈高端粒酶活性者７例，呈低端粒酶活性者ｌ３例，两者白　端粒酶活性显著高于慢性期，进一步说明了端粒酶活性升高可　细胞计数、红细胞计数、血红蛋白量、血小板计数差异无显著性　能是肿瘤发生过程中极为重要的一个环节，同时说明端粒酶活　（ｔ＝０．１４５—０．９２８，Ｐ＞０．０５）。　性与ＣＭＬ临床分期、疾病进展有着密切关系，可能是ＣＭＬ进展　３讨论　过程中白血病细胞增殖的一个分子标志，因此端粒酶活性可以　人类大部分的体细胞缺乏端粒酶活性，而大多数的原发性　作为一个有用的标志物来评价ＣＭＬ病程的进展。　肿瘤和肿瘤细胞株及永生细胞系表达端粒酶活性，因此，端粒　酶活性可能反映了一个高度增生的状态，是一种新的肿瘤标记　参考文献　物，与肿瘤发生密切相关。本文结果显示，ＣＭＬ慢性期和转化　［１］　张之南，沈悌．血液病诊断及疗效标准［Ｍ］．第２版．北　期端粒酶活性水平均升高，而ＩＤＡ、ＭＡ、ＩＴＰ等良性血液病及正　京：北京科学出版社，１９９８：２５８—２６７　常人端粒酶均阴性或低水平表达。这表明端粒酶活性与恶性　克隆增殖关系密切，有助于良恶性血液病的鉴别诊断。而良性　作者单位：１６１０００黑龙江省齐齐哈尔市中医医院检验科　一２１３—