烟台大学
细胞生物学实验报告
实验 二 实验名称 苏木精——伊红染色
实验日期 2014 年 10 月 23日 班级 生121-2 组别 四组 指导教师 王敏强
姓名 李斌 同组人姓名 王文娟、李萌萌、刘彩玲、张哲
1、为什么生物体的组织要经过如此繁琐的步骤才能观察其组织结构？
答：生物体是一个非常复杂的组合体，里面有各种组织结构，直接放在显微镜下是不能清楚地观察细微的结构，要想把各个组织观察清楚就应进行制片观察。另外，动物体的组织结构是比较脆弱的，想要观察一个生物体的组织，就必须尽量观察它完整的形态，步骤繁锁，进行一系列地制片切片以及石蜡包埋技术，最终可以在切片上用显微镜清楚地观察每一个组织的具体结构。
2、查阅文献，有哪些文章采用石蜡包埋切片和H.E.染色？
答：[1] 陈毅彪 ，李婷，郑春琴，郝向伟 ，韦转琴， 向仲怀，鲁成，崔红娟. 家蚕中肠上皮细胞增殖和分化的初步研究[J]. 蚕业科学,2013, 39(4)：0723—0731.
[2] 汪洋, 刘赞，叶海林，符竣惠，徐启纲, 曾其强，吴建波，张启瑜. 新型全肝脏去细胞化流程对细胞外基质及细胞组分残留量影响的研究[J]. 中国生物医学报，2013，,32
（1）：0258-8021.
[3] 王守梅, 杨秋红, 魏静静, 王雨稼, 张树辉. 比较胸腹水液基细胞学剩余标本制作细胞块的 3 种方法[J].第二军医大学学报, 2013,34(2)：0258-879.
[4] 郭丰成 ,历志 ,金超, 窦科峰. 红景天苷干预小鼠肝纤维化的研究[J]. 现代生物医学进展,2013,13(15)：1673-6273.
[5]赵圆宇，王亚平，郭洋，张仁东，杨正伟. 切片位置对兔睾丸组织体视学研究的影响[J]. 中国体视学与图像分析，2010,15（4）：1707-1482.
[6] 奉孝荣, 陈莉, 梁辉, 郑蓉. 胸腹水沉渣切片在脱落细胞学中的作用[J].2010,22(7)：1672-3511.
[7] 胥维勇,杨群. 两种骨髓活检组织制片方法的比较[J].实用医技杂志，2008,15（33）：1671-5098
[8] 杨立信, 徐志云, 张宝仁, 黄盛东, 叶福林. 骨髓基质干细胞构建组织工程心脏瓣膜的初步研究[J]. 第二军医大学学报，2003 ，24（12）：0258-879X.
[9] 彭彬，陈茂山，李惠，杨正伟. 不同器官石蜡包埋切片的切片压缩对比研究[J].中国体视学与图像分析.2012,17(3)：1007-1482.
[10] 李永梅, 夏潮涌, 覃莉. 石蜡包埋组织自动和手动切片对切片厚度的影响[J]. 中国体视学与图像分析,2009,14(1)：1007-1482
3、 通过查阅文献，谈一下石蜡包埋切片和H.E.染色的用途？
1、陈毅彪 ，李婷，郑春琴，郝向伟 ，韦转琴， 向仲怀，鲁成，崔红娟. 家蚕中肠上皮细胞增殖和分化的初步研究[J]. 蚕业科学,2013, 39(4)：0723—0731.本研究运用H.E.染色，观察家蚕幼虫生长及变态发育过程中肠的组织结构和形态变化，推测形态学上的柱状细胞、杯状细胞和再生细胞分别应该对应功能学上的肠细胞、肠内分泌细胞和中肠干细，并且推测再生细胞， 也就是我们要寻找和研究的肠道干细胞。
2、汪洋, 刘赞，叶海林，符竣惠，徐启纲, 曾其强，吴建波，张启瑜. 新型全肝脏去细胞化流程对细胞外基质及细胞组分残留量影响的研究[J]. 中国生物医学报，2013，,32（1）：0258-8021. 本实验观察不同去细胞阶段肝脏的大体形态，支架浸泡于多聚甲醛中固定，常规石蜡包埋，切片后H.E. 染色，光镜下观察组织的结构，并与正常肝脏组织进行对比然后得出实验结论。
3、 王守梅, 杨秋红, 魏静静, 王雨稼, 张树辉. 比较胸腹水液基细胞学剩余标本制作细胞块的 3 种方法[J].第二军医大学学报, 2013,34(2)：0258-879.本实验的研究目的是：优化胸腹水液基细胞学剩余标本制作细胞块的程序， 并探讨其在病理诊断中的应用价值。对 3 种细胞块常规脱水 石蜡包埋后， 连续切片 3 ～ 5 m，常规 H .E .染色后观察。
4、郭丰成 ,历志 ,金超, 窦科峰. 红景天苷干预小鼠肝纤维化的研究[J]. 现代生物医学进展,2013,13(15)：1673-6273. 在实验中对小鼠肝组织 H&E 染色 取相同部位肝叶组织， 10%甲醛充分固定，石蜡包埋 切片，常规 H-E 染色，光镜下观察肝脏组织，从而， 研究中药红景天苷对该模型是否有治疗作用，及可能的作用方式， 结合该药对大鼠肝纤维化的治疗作用，为临床应用该药提供指导。
5、赵圆宇，王亚平，郭洋，张仁东，杨正伟. 切片位置对兔睾丸组织体视学研究的影响[J]. 中国体视学与图像分析，2010,15（4）：1707-1482. 本实验目的比较不同包埋介质内切片位置对成年新西兰大耳白兔睾丸组织体视学研究的影响。方法 将成年雄性新西兰大耳白兔麻醉后,随机抽选一侧睾丸经液固定后从中央及两端平分得到2个1/4圆组织块,分别随机采用羟乙基甲基丙烯酸树脂或石蜡包埋、切片和染色后,在低倍镜(10×)下分别对睾丸组织树脂切片(25μｍ)和石蜡切片(7μｍ)不同切片位置进行观察利用体视学方法估计各视野睾丸组织内生精小管的体积分数。结果 石蜡切片较树脂切片估计的生精小管体积分数减少15.9%;树脂切片不同部位估计的生精小管体积分数无差异,而石蜡切片不同部位估计的结果存在差异:距离白膜愈远,体积分数愈小,近切片中心与近白膜相比显著减少了30.1%。结论 石蜡包埋能引起睾丸组织不均匀皱缩,因此,当应用石蜡切片进行睾丸体积分数研究时,应考虑不均匀组织皱缩因素。
6、奉孝荣, 陈莉, 梁辉, 郑蓉. 胸腹水沉渣切片在脱落细胞学中的作用[J].2010,22(7)：1672-3511. 方法对358例胸腹水沉积物进行拉片和石蜡包埋连续切片,HE染色。结果 在组织学证实的85例胸腹腔癌瘤所致的胸腹水沉积物连续切片,全部为阳性,而拉片中阳性为49例,两者之间有显著差异性(P<0.01),拉片38例可疑恶性肿瘤,沉积物连续切片32例为阴性,6例为恶性肿瘤。结论：胸腹水沉积物石蜡包埋切片避免了单一拉片的局限性,切片细胞丰富,易于观察肿瘤细胞的组织学形态,可降低脱落细胞学的误诊风险,从而提高脱落细胞学诊断价值。
7、胥维勇,杨群. 两种骨髓活检组织制片方法的比较[J].实用医技杂志，2008,15（33）：1671-5098.本实验分别采用了石蜡包埋和塑料包埋两种方法，通过两种方法的比较得到两种技术的优缺点及适用对象。
8、 杨立信, 徐志云, 张宝仁, 黄盛东, 叶福林. 骨髓基质干细胞构建组织工程心脏瓣
膜的初步研究[J]. 第二军医大学学报，2003 ，24（12）：0258-879X. 本实验分别用石蜡包埋切片H.E染色、免疫组化染色、扫描电镜及透射电镜检查观察TEHV的组织学结构并鉴定细胞类型。
9、彭彬，陈茂山，李惠，杨正伟. 不同器官石蜡包埋切片的切片压缩对比研究[J].中国体视学与图像分析.2012,17(3)：1007-1482.从一只成年雄性SD大鼠的肺、心、肝、睾丸和脊髓腰膨大各切去3个长宽高约为2mm的组织块，石蜡包埋后从每个组织块切去5~40um厚的切片3张进行HE染色，然后利用体视学系统测量染色后的实际厚度通过比较得出结论：不同的器官有显著的差异。
10、 李永梅, 夏潮涌, 覃莉. 石蜡包埋组织自动和手动切片对切片厚度的影响[J]. 中国体视学与图像分析,2009,14(1)：1007-1482本实验选取5只成年健康雄性ＳＤ大鼠的肝、胰腺、胃及肺4种组织,各组织单独包埋制成蜡块,预设电动切片机的切片厚度刻度值为3、5、7、10μｍ,分别作自动和手动两种方法切片,所获得的薄组织片经二次包埋、切片、ＨＥ染色,ＴＩＧＥＲ图像分析仪测量切片的实际厚度。结果 组织切片实测厚度受自动和手动两种切片方法的影响,切片机的切片厚度预设值低估了石蜡包埋组织切片的真实厚度,自动和手动实测切片厚度分别比切片机预设切片厚度要厚29%～50%和48%～91%。结论 自动切片与手动切片的切片厚度相差25%,二者相对误差为61%,自动切片获得的组织切片的厚度精度较高,优于手动切片。
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