外出植物病害实习

植物病虫害标本是植物病虫害及其分布的实物性记载，有了标本即可在室外观察的基础上，开展室内各方面的研究工作。一份好的病虫害标本本身就是完整的症状描述和性状特征的记载，从而能更准确的识别各种植物病虫害。标本采集和制作技术是植保工作者必须掌握的基本技术之一。

一、目的意义：通过各类病害标本的采集、制作加深对各类病害的感性认识，了解各种昆虫的生活习性，采集对象的变态类型、栖息场所、发生时间等。掌握植物病虫害标本的采集和制作方法。

二、仪器用品与材料：标本夹，采集箱，塑料袋，放大镜，小刀，果枝剪，纸，捕虫网，毒瓶，三角纸袋，镊子，剪子，软毛笔，指形玻璃管，小铁铲，小铁纱笼，木制标本盒，铅笔，记录本及小标签等。 三、内容与方法

（一）病害标本的采集、制作和保存

１．标本采集要求：为提高标本的使用价值，对所采标本特提出如下要求。

标本采集是获取植物病害标本的重要途径，也是熟悉植物病害症状，了解植物病害发生情况的最好方式。植物病害的发生时期与植物的生育期及采集地的地理生态环境、生产条件、病原物的生物学特性等密切相关。采集标本时，应注意症状要典型。对于真菌病害要尽量采集带有子实体的标本；病毒病要采集顶梢与新叶；幼嫩多汁的子实体或果实材料，应先用标本纸分别包装放于标本桶内，避免因挤压而变形。黑粉、黑穗病应及时放入标本袋中，并注意相互隔离；对于较易失水的叶片，应注意随采随压，以免叶片打卷而不易展开；线虫病的病根以及果树根癌病的病根要用铁铲挖取整个根部，装入采集桶中。采集时要有完整的野外采集记录，记载的主要内容有：寄主名称、病害名称、采集地点、采集日期、海拔高度、生态环境、发病情况、采集序号等。一般情况下，各种病害标本最好采集１０份以上。 ２．标本的制作

（１）干标本的制作:通常所叫的蜡叶标本就是经过压制的干标本。方法是把含水量较少的标本，如植物的茎、叶以及去掉果肉的病果皮等，分层压在标本夹的吸水纸层中，同时将写好的标本采集记录标签放入标本夹中，标本夹压紧后日晒或加温烘烤，使其干燥。标本干燥愈快，保持原色的效果愈好。所以，干制标本质量的好坏，关键在于勤换纸，勤翻晒。一般情况下，第一周每天换干燥吸水纸１～２次，以后可隔天换纸，视情况而定，直至标本完全干燥。果实及较粗大茎的标本干燥应置于朝阳通风处，自然干燥，同时定时翻动，以利标本整体均匀干燥。

（２）液浸标本的制作及保色处理:多汁的果实、块茎、块根及多肉子囊菌和担子菌的子实体等标本，不适于干制，必须用浸渍法保存。常用的浸渍液及其用法如下：１）普通防腐浸渍液只适于防腐，没有保持原色的作用，如萝卜、甘薯等不要求保色的标本，洗净后直接浸入下列溶液中。５％的福尔马林浸渍液：福尔马林，50ｍＬ；酒精(95％)，300ｍＬ；水,2000ｍＬ。上述浸渍液亦可简化为５％的福尔马林液或70％的酒精溶液,70％的酒精液对于保存多肉子囊菌及鬼笔目的子实体甚为适宜。亚硫酸浸渍液：亚硫酸（饱和溶液）, 500ｍＬ；酒精（９５％），５００ｍＬ；水，４０００ｍＬ。 ２）保存绿色标本的浸渍液 Ａ．醋酸铜及福尔马林液浸渍法。以５０％的醋酸、溶解醋酸铜结晶至饱和程度（约１０００ｍＬ５０％的醋酸加入１５ｇ醋酸铜即可达到饱和程度），然后将饱和液稀释３～４倍后使用。标本颜色浅者稀释倍数可大些，颜色深者稀释倍数可小些。醋酸铜液处理标本分热处理和冷处理两种方法。热处理法是将稀释后的醋酸铜液加热至沸腾，投入标本。标本的绿色最初被漂去，经数分钟等绿色恢复至原来程度，立即取出标本用清水洗净，然后保存于５％的福尔马林液中。由于热处理标本易使茎、叶变软，果实破裂，因此，亦可采用冷处理法，其效果

也很好。如小麦叶、玉米叶、棉花叶等标本，以２～３倍的醋酸铜稀释液冷浸，经３ｈ绿色退去，再经７２ｈ又可恢复原来的绿色，然后取出用清水冲净，保存于５％的福尔马林液中。溶液经多次处理标本后，铜离子会逐渐减少，如要继续使用，应补充适量的硫酸铜，才能保持其保色的能力。Ｂ．硫酸铜及亚硫酸浸渍法。将标本在５％的硫酸铜溶液中冷浸６～２０ｈ，当绿色恢复后，取出用清水冲净，然后保存在亚硫酸溶液中（以含５％ ～６％ ＳＯ２ 的亚硫酸溶液４５ｍＬ加水１０００ｍｌ配成，或以浓硫酸２０ｍＬ加在１０００ｍＬ的水中，然后再加入亚硫酸纳１６ｇ配成亦可）。 ３）保持黄色和橘红色标本的浸渍液亚硫酸是杏、梨、柿、黄苹果、柑橘及红辣椒等果实标本适宜的浸渍液。亚硫酸浸渍液的浓度，一般用市售的亚硫酸（含ＳＯ２５％ ～６％ 的水溶液）配成４％ ～１０％ 的稀溶液（４％ ～１０％的溶液含ＳＯ２ 为０．２％ ～０．５％）即可。 ４）保持红色标本的浸渍液标本的大部分红色是由花青素形成的，花青素能溶于水和酒精，因此，保存标本的红色是比较困难的。常用Ｈｅｓｌｅｒ浸渍液配法如下：氯化锌，５０ｇ；福尔马林，２５ｍＬ；甘油，２５ｍＬ；水，１０００ｍＬ。将氯化锌溶于热水中，加入福尔马林，如有沉淀，用其澄清液。此溶液适用于由于花青素而显红色的标本，如苹果、番茄等。

（３）标本瓶的封口保存标本的浸渍液，多用具有挥发性的或易于氧化的化学物质，所以，必须密封瓶口才能长久保持浸渍液的效用。

１）暂时封口法取蜂蜡及松香各１份，分别熔化，然后混合，并加入少量的凡士林调成胶状物即成。或以明胶４份在水中浸数小时，将水滤去，加热熔化，拌入１份石蜡，熔化混合后成为胶状物，趁热使用。

２）永久封口法用明胶２８ｇ在水中浸数小时，将水滤去加热熔化，再加入０．３２４ｇ的重铬酸、并加入适量的熟石膏使成糊状，即可使用。

３．标本的保存:制成的标本，经过整理和登记，然后依一定的系统排列和保藏。菌类标本一般按分类系统排列，要有两套索引卡片，一套是寄主索引，一套是菌类索引，以便于寻找和整理。标本室（柜）要保持干燥１清洁，并要定期施药以防虫蛀与霉变。

（１）标本盒保藏教学和示范用的干制病害标本，采用玻面纸盒保藏比较方便，玻面纸盒的适宜大小为２０ｃｍ×２８ｃｍ×２ｃｍ。纸盒中先铺一层棉花，并在棉花中加少许樟脑粉以驱虫。最后在棉花上放上标本和标签。

（２）标本瓶保藏浸渍的标本放在标本瓶内保藏，为了防止标本下沉和上浮，可绑在玻璃条上，然后再放入标本瓶。标本瓶的口盖好后滴加石蜡封口，然后贴上标签。 （３）纸套内保藏牛皮纸袋或牛皮纸夹的大小以４０ｃｍ×３０ｃｍ为宜。这种方法适用于保存研究标本及教学上的消耗性标本。大量保存的干制标本，大多采用纸套保藏，将标本装入纸套内，并在纸套上贴好标签，放在标本柜中即可。标签上的项目应包括寄主、病害名称、病原学名、采集人、鉴定人、采集日期和采集号等。 （二）昆虫标本的采集、制作和保存 １．采集工具

采集昆虫的工具种类很多，常用的采集工具有采集网、采集伞、吸虫管、诱虫灯等。（１）采集网是采集昆虫最常用的工具，网的形状和构造因用途不同也不完全一样，大致可分为４类：捕网、扫网、水网和刮网。以捕网应用最广。用竹或轻木等作柄，长６２．５ｃｍ，直径约２～３ｃｍ。网袋用纱布制成（以蚊帐纱布为宜），袋的直径约３０～４０ｃｍ，袋底应逐渐阔圆，不可尖出，袋的长度至少能转覆。一般长度大于袋直径的１．５～２．５ｃｍ，袋的边缘缝以粗布条。然后将网袋用铁铝丝作成圆形网架套入，用钢铁丝紧紧缚在柄上。 （２）毒瓶用玻璃瓶（大小可选用，但应是大口的）加上橡皮盖为宜。先将氰化钠（ＮａＣＮ）或氰化钾（ＫＣＮ）压碎，置于瓶底，上加一层锯末，再加以薄层石膏摊平压实后，用滴管沿瓶壁加适量的水，使石膏变硬固定。然后在瓶内石膏上铺上一张圆形吸水纸，以吸取

多余的水分。瓶内并放一些细长纸条以减少虫体接触摩擦。

（３）纸袋害虫被毒死后，一般将体形较扁的鳞翅目成虫翅摺叠放入三角形的纸袋内（以纸质光滑，略透明为宜），体形粗大的如直翅目、半翅目、鞘翅目害虫可装于纸筒（或旧信封）及盒内。纸袋上应写明采集日期、地点、寄主和害虫所属、目、科等。 ２．采集方法

（１）手捕捉大型及动作迟缓的昆虫可用手捉。但鳞翅目成虫不宜手捉（易搞掉鳞粉），有毒剌、毒毛、臭腺的昆虫不宜手捉，体甚小而细弱的昆虫也不宜手捉。

（２）毒瓶扣捕对静止的或正在取食中的鳞翅目成虫可用此法捕捉，得到的标本非常完整。 （３）网捕一般追捕飞翔的昆虫，捕捉后应立即将网摺转，使网口封闭。对静止的昆虫可用手拉住网底，将网慢慢掩盖虫体捕捉。草丛及作物丛中的小型昆虫可用网来回扫捕。

（４）振落对一些有伪死性的害虫（如象甲等），可用网张于其下，设法振摇，使其受惊伪死坠入网中。 ３．标本的制作 （１）制作的工具

昆虫标本的制作工具有：虫针，规格１～５号为宜，也可用缝衣针代替；干燥板，为长方形木板，大小随意，但质地需松软，以供标本整姿用；展翅板，木材质地，亦应松软。展翅板下面为一长方形的底，上架两块狭长的板，略向中间倾斜。中间为一沟，底的中间可贴附１条木栓，以插虫针。一般板长３６ｃｍ，表面至木栓高２ｃｍ，至于板和沟的宽度则视昆虫大小而定。也可将两块狭长的板作成一块活动的，以调节沟的宽度。 （２）制作方法

针插标本：一般多用于分类。昆虫毒死后约１０～１６ｈ，此时虫体及附肢尚柔软，即可制作。制作时根据虫体大小选用虫针，插针时一般昆虫从中胸背面中央插入，从腹面两中足基节间穿出。针需垂直，如虫体细长者（如蝶类），针可稍向前倾斜，使腹部不致下垂。直翅目（如蝗虫、蝼蛄等）的前胸背板甚大，且掩盖中胸背板，故针应从前胸背板后部插入。半翅目（如蝽等）则都由三角形的中胸小盾片处插针。鞘翅目（如金龟甲、天牛等）则从右翅鞘前部插入，中后足之间穿出。需展翅的标本，在展翅板上操作。将虫体以插入之针固定于展翅板的沟中，使虫体背面与沟平齐，以便将前后翅展平于展翅板的两块狭板上，用镊子或虫针沿翅的前缘轻轻将翅展平（当心不要弄破翅或弄掉鳞片），同时以狭纸条压住翅，以虫针（或缝衣针、大头针）固定。展翅各类昆虫要求不一，原则是能充分显露出翅面上的特点，并使外形美观。直翅目、半翅目、鳞翅目、脉翅目（如草蛉）要求两侧的前翅后缘成一直线，后翅紧接于前翅，但鳞翅目的后翅过大，其前缘可有一部分被前翅所掩盖，但不要掩于前翅之上。半翅目、膜翅目前后翅间有连接器（翅钩），可以利用。双翅目展翅要求两侧前翅的前端成一直线。鞘翅目（很少展翅者）需要展翅则要求两侧后翅前缘成一直线。各目昆虫触角除很长者需拉向后方外，都向前外方整成生前的自然形状。不需展翅的标本需整姿。整姿也是要求使各部分特征尽量显露，以便检查。整姿时可用镊子或虫针将附肢拉至一定位置，用针或纸条压住。一般要求触角整成向前外方伸直（触角长者如天牛，则拉向后方），前足向前，中、后足向后（但双翅目昆虫则要求前中足向前，后足向后，以与其生前状态相同）。足应弯曲，勿整成一直线。后足甚长者，也勿使其越过腹部末端过远。整姿标本一般在平板上操作，等标本干燥后取下，将插针调节至一定高度，并加标签，记载害虫种名，所属目科以及采集日期、地点、寄主等。很微小的昆虫不便展翅整姿和针插，可用台纸复制法制作，即将台纸（白色硬纸或废的照相底片）剪成宽８ｍｍ、长３ｍｍ 的长方形或三角形，把虫贴于一端（如为三角形纸则贴于尖角一端），以虫针插于另一端，但贴于纸上的虫体仅可见其上面，故每一种害虫背、侧、腹面向上各贴置一头。贴虫剂的配制：阿拉伯胶粉６０份，石炭酸２份，９５％酒精８份，糖３０份，蒸馏水４５份。先将液体混合，再投入糖溶

化，最后投入阿拉伯胶粉使其逐渐溶化，切勿加热。平板标本：主要用于盒装标本，在缺展翅板条件下，也可用来制作针插分类标本。在平板上操作，展翅、整姿方法同前。展翅整姿完后，应立即轻轻将插入虫体的针拔出。如采集标本过多，一时无法制作或置久干硬，应将标本放于软化器内软化２～７ｄ。过久的标本，软化器内的水可加温至３０～４０℃。鞘翅目等大型标本也可置于温水内软化。软化后的标本应充分干燥，以免生霉。软化器为长方形扁盆，以铝质或玻璃为宜，盖须紧密，中间放铁纱网一层，上放标本，下放湿棉团或水，水中加少许石炭酸以防腐。浸渍标本：主要保存幼虫，也可保存部分成虫、蛹、卵或被害状。幼虫体内多汁液，一般也不需整姿，可浸渍保存。采集的幼虫最好使其粪便排净，以热水烫５ｍｉｎ（特别是白色幼虫），再浸于保存液中。常用的保存液为：７０％酒精；酒精甲醛保存液：９６％的酒精１８ｍＬ，３０％醋酸２ｍＬ、４０％甲醛２ｍＬ、蒸馏水６０ｍＬ；白糖水保存液：甲醛４ｍＬ、冰醋酸５ｍＬ、白糖５ｇ、蒸馏水１００ｍＬ__上述保存液以白糖保存液为好，保存的标本不易皱缩变形、变黑，也比较不易褪色。但幼虫多系化学色，一般浸渍过久色易褪去，尤其是绿色、红色标本，目前尚无很理想的浸渍保存液，故应注意标本的更新和浸渍液的更换（浸渍液一般１～２年应更换１次）。

４．标本的整理和保存: 标本的整理应按分类程序整理，分别按目、科插入标本盒内。标本盒底面铺一软木板，以供插针，可用木质或玻璃做盖面。盒的四角内盛放防虫剂的小型玻管，以别针支住。平板制作的标本多用作生活史和展览用标本，用吸水纸盒或木盒，内铺棉花，上面平放标本（幼虫可装入内有浸渍液的小玻璃管内，以棉胶或石蜡封紧后，装入），并加放标签，盖用玻璃制作，以便观察。标本应存放于干燥处，以免受潮生霉。标本存放时，如发现皮蠹等为害，可放于４０℃的烤箱中烘烤一昼夜或以熏蒸剂及敌敌畏熏杀灭虫。 四、思考题与作业

１．在采集植物真菌病害标本时，为什么要尽量采集带有子实体的标本？ ２．病害标本是否一定要压制或浸泡保存？仁果、浆果病害如何保存？

３．根据实践体会谈谈具体植物病虫害标本采集、制作的主要方法及应注意的问题。 ４．昆虫生活史标本如何制作？

５．每人提交已制作并经初步鉴定的病害、昆虫标本各20份。