1、切割质粒和目的基因的限制酶必须是同-.种酶,以获得相同的黏性末端,利于重组质粒的构建。插入的目的基因只是结构基因部分,其表达需要调控序列,因而用作载体的质粒的插入部位前须有启动子,后须有终止子。
2、通过载体把目的基因片段导入活细胞。构建基因表达载体也就是把目的基因和载体连接,使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。